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原文传递一种乙型肝炎表面抗原检测方法

专利名称：	一种乙型肝炎表面抗原检测方法
摘要：	本发明提供了一种乙型肝炎表面抗原检测方法，所述方法包括以下步骤：(1)制备血清样本：采集静脉血，分离得到血清，然后再将血清高速离心1‑2次，得到待检测血清样本；所述高速离心条件为：4‑10℃，10000‑15000rpm/min离心3‑8min；(2)加样：向包被有针对乙型肝炎表面抗原的单克隆抗体的反应孔中加入待检测血清样本40‑50uL；所述单克隆抗体的克隆号为86C；(3)加酶标抗体：向反应孔中加入酶标抗体50±1uL，然后用封板膜覆盖反应板，将反应板置于37±1℃孵育35‑45min；(4)洗涤；(5)显色；(6)终止；(7)测定。上述检测方法能实现乙型肝炎表面抗原的准确检测，特别是针对高脂血症的人群的检测时，具有样本量需求少、反应孔体清晰干净，背景低的优点。
专利类型：	发明专利
申请人：	吉林金域医学检验所有限公司
发明人：	兰丽媛;李雨艳;周婷婷;许友强;段学成;常红叶;关宝杰;王双阁
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T17:00:00+0805
申请号：	CN201911422123.3
公开号：	CN111024950A
代理机构：	广州广典知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	万志香
分类号：	G01N33/577;G01N33/576;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/577;G01N33/576
申请人地址：	130000 吉林省长春市高新开发区光谷大街1977号办公楼二、三、四层
主权项：	1.一种乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)制备血清样本：采集静脉血，分离得到血清，然后再将血清高速离心1-2次，得到待检测血清样本；所述高速离心条件为：4-10℃，10000-15000rpm/min离心3-8min； (2)加样：向包被有针对乙型肝炎表面抗原的单克隆抗体的反应孔中加入步骤(1)获得的待检测血清样本40-50uL；所述单克隆抗体的克隆号为86C； (3)加酶标抗体：向反应孔中加入酶标抗体50±1uL，然后用封板膜覆盖反应板，将反应板置于37±1℃孵育35-45min； (4)洗涤； (5)显色； (6)终止； (7)测定。 2.根据权利要求1所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中分离血清的条件为：3000±50rpm/min离心3-5min。 3.根据权利要求1所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中高速离心条件为：4-10℃，11000-13000rpm/min离心3-5min。 4.根据权利要求1-3任一项所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中加入待检测血清样本45uL。 5.根据权利要求1-3任一项所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中的酶为辣根过氧化物酶。 6.根据权利要求1-3任一项所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中洗涤为：用洗涤液充分洗涤反应孔3-5次，每次洗涤后扣干反应板。 7.根据权利要求6所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，每次洗涤时要保持30-60s的浸泡时间。 8.根据权利要求1-3任一项所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(5)中显色为：向反应孔中加入底物A、B各50uL，混匀后于37℃避光反应15min。 9.根据权利要求1-3任一项所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(6)中终止为：向反应孔中加入终止液50uL，混匀。 10.根据权利要求1-9任一项所述的乙型肝炎表面抗原检测方法，其特征在于，所述步骤(7)中用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm进行吸光值测定。
所属类别：	发明专利