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原文传递一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法

专利名称：	一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法
摘要：	本发明提出了一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，通过利用电子穿刺图谱技术(Electropenetrography/the Electrical Penetration Graph，EPG)来实现监测蚜虫在油菜植株上的取食行为，并在这一基础上，分析出不同品种油菜之间的抗蚜性大小。
专利类型：	发明专利
申请人：	安徽省农业科学院作物研究所
发明人：	郝仲萍;侯树敏;詹海霞
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T15:00:00+0805
申请号：	CN201911383812.8
公开号：	CN111157678A
代理机构：	合肥市长远专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	杨霞
分类号：	G01N33/00;G01R29/02;A01G7/00;A01K67/033;G;A;G01;A01;G01N;G01R;A01G;A01K;G01N33;G01R29;A01G7;A01K67;G01N33/00;G01R29/02;A01G7/00;A01K67/033
申请人地址：	230000 安徽省合肥市农科南路40号
主权项：	1.一种采集蚜虫对油菜取食行为的EPG参数的方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)将甘蓝蚜用导电银胶将金丝一端固定于背部后，放置于繁育蚜虫的植株上过夜适应，同时选择油菜植株作为测试对象； (2)将金丝的另外一端接到DC-EPG系统上，同时将植物电极插入植株土壤中，再将饥饿处理后且连接金丝的甘蓝蚜置于油菜植株上，在法拉第笼中进行试验；当甘蓝蚜的口针刺入植物组织时，由甘蓝蚜口针为微电极和植物根部土壤为参比电极构成的回路接通，获取甘蓝蚜在油菜植株上对应至少6h取食行为所产生的一系列电信号； (3)将上述电信号经DC-EPG系统放大处理后，转化成数字信号，再以波形数据的形式进行记录，获取蚜虫在油菜上对应取食行为的EPG波形； (4)将EPG波形进行类比、分析以及认定，参照蚜虫取食行为与EPG波形的对应关系，将EPG波形划分为5种类型：口针在植株外部产生的非刺探波np，口针在表皮以及叶肉中穿刺、唾液分泌以及其它行为产生的路径波C，口针在细胞内穿刺产生的电势降pd，口针在韧皮部内分泌唾液产生的分泌波E1和口针在韧皮部取食产生的取食波E2； (5)将上述EPG波形包含的非刺探波np、路径波C、细胞内穿刺波pd、唾液分泌波E1、取食波E2对应的时间、次数进行统计、筛选，获得蚜虫对油菜取食行为的EPG参数。 2.根据权利要求1所述采集蚜虫对油菜取食行为的EPG参数的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述甘蓝蚜为新羽化2天的无翅甘蓝蚜；所述油菜植株为发育到4叶期的油菜植株；步骤(2)中，所述饥饿处理的时间优选为1h。 3.根据权利要求1或2所述采集蚜虫对油菜取食行为的EPG参数的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述DC-EPG系统为荷兰Wageningen University生产的Giga4型号的4通道的DC-EPG系统；优选地，所述DC-EPG系统的一个通道只能连接一根长2cm，直径18μm的金丝，一根金丝也只能连接一头甘蓝蚜。 4.根据权利要求1-3任一项所述采集蚜虫对油菜取食行为的EPG参数的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述试验在室内、恒定光照以及25±1℃的温度下进行；优选地，试验过程中，每株油菜植株与每头甘蓝蚜仅用于1次试验，至少有20次有效重复试验。 5.一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，其特征在于，包括如下步骤： S1、采用不同品种的油菜植株作为测试对象，按照权利要求1-4任一项所述的方法，获取甘蓝蚜对各品种油菜植株取食行为的EPG参数； S2、对所述EPG参数进行筛选，选择出与油菜抗蚜性鉴定相关性最强的一组EPG参数进行研究； S3、所述与油菜抗蚜性鉴定相关性最强的一组EPG参数中，若与E1波相关的EPG参数越大，与E2波相关的EPG参数越小，表明该品种的油菜抗蚜性越强，反之则表明该品种的油菜抗蚜性越弱。 6.根据权利要求5所述鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，其特征在于，步骤S2中，所述与油菜抗蚜性鉴定相关性最强的一组EPG参数包括：第一个E波之前非探测的持续期、开始到第一个E波的时间、探测的次数、探测的总时间、非探测的总时间、非韧皮部阶段的总持续期、开始到第一个E2波的时间、到第一次探测的时间、第一个E1波之前的探测次数、每次探测中pd波的平均发生次数、短暂探测(C波<3minutes)的次数、pd波的个数、pd波的总持续期、C波的总持续期、从探测开始到第一个E波的时间、从第一次探测开始到第一个pd波的时间、C波所占的百分比、E1波的个数、E1波占韧皮部阶段的百分比、后面接第一个持久E2波(>10min)的E1波的持续期、后面接持久E2波(>10min)的E1波的总持续期、潜在的E2波指数、E波的总持续期、E1波的总持续期、E2波的总持续期、最长E2波的持续时间、持久E2波(>10min)占E2波的比例、E1波占测试时间的百分比、E2波占测试时间的百分比。 7.根据权利要求5或6中所述鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，其特征在于，步骤S3中，所述“与E1波相关的EPG参数越大，与E2波相关的EPG参数越小”具体为“E1波占韧皮部阶段的百分比越大”，即若E1波占韧皮部阶段的百分比越大，表明该品种的油菜抗蚜性越强，反之则表明该品种的油菜抗蚜性越弱。 8.根据权利要求5-7任一项所述鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，其特征在于，步骤S3中，所述“与E1波相关的EPG参数越大，与E2波相关的EPG参数越小”具体为“E2的总持续期越小”，即若E2的总持续期越小，表明该品种的油菜抗蚜性越强，反之则表明该品种的油菜抗蚜性越弱。 9.根据权利要求5-8任一项所述鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，其特征在于，步骤S3中，若短暂探测的次数(即持续时间＜3min的路径波C的次数)越多，C波的总占比越高，表明该品种油菜抗蚜性越强，反之则表明该品种的油菜抗蚜性越弱。 10.根据权利要求5-9任一项所述鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，其特征在于，步骤S3中，若探测的总时间越长，非探测的总时间越短，表明该品种的油菜抗蚜性越弱；反之则表明该品种的油菜抗蚜性越强。
所属类别：	发明专利