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原文传递一种检测除草剂敌稗的仿生免疫荧光试纸条及其制备方法和应用

专利名称：	一种检测除草剂敌稗的仿生免疫荧光试纸条及其制备方法和应用
摘要：	本发明公开了一种检测除草剂敌稗的仿生免疫荧光试纸条及其制备方法和应用，特点是包括样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC底板，PVC底板上按顺序依次粘附有样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜和吸水垫，硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，检测线和质控线上包被有敌稗分子印迹聚合物‑量子点复合物，其制备方法包括敌稗分子印迹聚合物‑量子点复合物的制备步骤；将敌稗分子印迹聚合物‑量子点复合物均匀吸附在硝酸纤维素膜上，形成荧光强度一致的检测线T线和质控线C线，在PVC底板上按顺序依次粘附样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜和吸水垫得到试纸条的步骤，优点是选择性强、灵敏度和准确性高。
专利类型：	发明专利
申请人：	宁波大学
发明人：	史西志;张泽明;刘晨曦;张蓉蓉;孙爱丽;陈炯
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
申请号：	CN201911416705.0
公开号：	CN111175510A
代理机构：	宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	何仲
分类号：	G01N33/58;G01N33/53;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/58;G01N33/53
申请人地址：	315211 浙江省宁波市江北区风华路818号
主权项：	1.一种检测除草剂敌稗的仿生免疫荧光试纸条，包括样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC底板，所述的PVC底板上按顺序依次粘附有样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述的硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，其特征在于：所述的检测线和所述的质控线上包被有敌稗分子印迹聚合物-量子点复合物。 2.根据权利要求1所述的一种检测除草剂敌稗的仿生免疫荧光试纸条，其特征在于：所述的检测线与所述的质控线之间的间隔距离为5 mm，所述的检测线和所述的质控线之间的硝酸纤维素膜的中间隔断距离为1 mm。 3.一种权利要求1所述的检测除草剂敌稗的仿生免疫荧光试纸条的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）敌稗配制采用由环己烷和丙酮按体积比9：1的比例混合而成的溶液为溶剂配制敌稗溶液；（2）敌稗分子印迹聚合物-量子点复合物的制备将1.8 mL的Triton x-100和7.5 mL的致孔剂环己烷加入圆底烧瓶，以400 r/min的速度常温搅拌15 min，然后向圆底烧瓶中加入400 μL浓度为1 mg/mL 的溶于氯仿的CdSe/ZnS量子点溶液，再加入50 μL的交联剂TEOS和100 μL的氨水，黑暗常温搅拌2小时；将45.6 μL的APTES和110 μL的浓度为25 mg/mL的敌稗溶液加入到小棕瓶中，黑暗中搅拌2小时后；目的是待测物质敌稗与功能单体APTES的键合；将小棕瓶中的混合物倒入圆底烧瓶，继续黑暗环境下搅拌12小时；然后倒入盛有10 mL丙酮的离心管中，等待沉淀完成后，以9000 r/min离心10分钟后，去除上清液；离心管中加入6 mL 超纯水，震荡20分钟后以9000 r/min离心20分钟后，去除上清液；离心管中加入由乙醇和乙腈按体积比8：2的比例混合而成的溶液，超声均匀后震荡40分钟后，以9000 r/min转速离心15分钟，去除上清液；重复用由乙醇和乙腈按体积比8：2的比例混合而成的溶液洗涤除去模板分子敌稗直到用荧光分光光度计测量聚合物的荧光值不再变化，即得到敌稗分子印迹聚合物-量子点复合物，将其加入到含有1 mL乙醇的琥珀色玻璃瓶内，放置在4℃冰箱避光保存；（3）硝酸纤维素膜上检测线T线和质控线C线的制备将洗脱去模板分子的敌稗分子印迹聚合物-量子点复合物均匀吸附在硝酸纤维素膜上，形成荧光强度一致的检测线T线和质控线C线，常温下干燥避光保存；（4）仿生免疫荧光试纸条的制备在PVC底板上按顺序依次粘附样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜和吸水垫，得到检测除草剂敌稗的仿生免疫荧光试纸条。 4.一种权利要求1-3中任一项所述的检测除草剂敌稗的仿生免疫荧光试纸条的检测方法，其特征在于包括以下步骤：将检测除草剂敌稗的仿生免疫荧光试纸条水平放置，用滴管向试纸孔缓慢逐滴加入含有待测样品的检测体系，在紫外灯下，当存在高于0.005 mg/L的敌稗分子时，可以肉眼捕捉检测线处明显的荧光猝灭，即可以判断检测体系中是否存在敌稗，检测体系配置方法为：配制4 mmol/L的PBS缓冲液，加入氯化钠使体系中氯化钠浓度为0.045 g/L，调整混合液pH 为9，将待测样品溶于检测体系中即可。其中优化该检测体系的目的是提高荧光试纸条的灵敏度，具体实验操作目的是该体系可以用于配制不同浓度敌稗分子的溶剂。
所属类别：	发明专利