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原文传递一种污染物对斑马鱼生物毒性影响的评价方法

专利名称：	一种污染物对斑马鱼生物毒性影响的评价方法
摘要：	本发明提供一种污染物对斑马鱼生物毒性影响的评价方法，包括采用斑马鱼胚胎、斑马鱼仔鱼和斑马鱼成鱼分别进行毒性试验，分别获得不同生长阶段斑马鱼的LC50值和/或亚致死剂量；选取LC50值和/或亚致死剂量最低的生长阶段斑马鱼作为最敏感阶段斑马鱼；采用最敏感阶段斑马鱼的LC50值和/或亚致死剂量评价污染物的毒性强弱；该评价方法通过对不同生长阶段斑马鱼分别进行毒性试验，能够根据污染物对不同阶段斑马鱼的生物毒性差异确定最敏感阶段斑马鱼，通过对斑马鱼最敏感阶段的确定，对斑马鱼的保护工作具有重要指导意义；另外，以最敏感阶段斑马鱼的生物毒性评价污染物的毒性强弱，提高了污染物毒性评价的准确性。
专利类型：	发明专利
申请人：	中国水产科学研究院
发明人：	穆希岩;李应仁;刘佳;袁立来;黄瑛;朱锋;李绪兴
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T22:00:00+0805
申请号：	CN201911409214.3
公开号：	CN111189999A
代理机构：	北京风雅颂专利代理有限公司
代理人：	张拥
分类号：	G01N33/50;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/50
申请人地址：	100000 北京市丰台区永定路南青塔村150号
主权项：	1.一种污染物对斑马鱼生物毒性影响的评价方法，其特征在于，包括如下步骤： (a)采用斑马鱼胚胎、斑马鱼仔鱼和斑马鱼成鱼分别进行毒性试验，分别获得不同生长阶段斑马鱼的LC50值和/或亚致死剂量； (b)选取LC50值和/或亚致死剂量最低的生长阶段斑马鱼作为最敏感阶段斑马鱼； (c)采用最敏感阶段斑马鱼的LC50值和/或亚致死剂量评价污染物的毒性强弱。 2.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述毒性试验为水源性暴露试验；所述水源性暴露试验包括：先进行预实验，获得最高无影响污染物浓度和最低全致死污染物浓度；在最高无影响污染物浓度和最低全致死污染物浓度之间配制梯度浓度的含有污染物的培养液，并分别对斑马鱼胚胎进行暴露，且每天记录所有斑马鱼的发育情况。 3.根据权利要求2所述的评价方法，其特征在于，所述斑马鱼胚胎亚致死指标包括：畸形、心跳减缓、发育迟缓和自主运动次数减少；所述畸形包括卵黄囊水肿和心包水肿；所述发育迟缓包括孵化延迟和体长下降；所述斑马鱼仔鱼亚致死指标包括：体长下降、脊柱弯曲和心跳次数减缓；所述斑马鱼成鱼亚致死指标为运动异常；所述运动异常为游动失衡、翻转或游动减少。 4.根据权利要求3所述的评价方法，其特征在于，所述斑马鱼胚胎亚致死致毒剂量通过如下方法确定：先采用单因素方差分析法，确定污染物处理组和空白对照组之间同一指标的显著差异性，通过与空白对照组相比具有显著性差异的最低污染物浓度为该指标的致毒剂量，在所有指标中选择致毒剂量最低的污染物浓度为所述斑马鱼胚胎亚致死致毒剂量。 5.根据权利要求2所述的评价方法，其特征在于，所述暴露过程中每天更换不低于70％的培养液。 6.根据权利要求2所述的评价方法，其特征在于，所述斑马鱼胚胎进行毒性试验时，所述暴露过程中培养液温度为27～28℃，每天光照时间和黑暗时间比例为(6～8)∶5。 7.根据权利要求4所述的评价方法，其特征在于，所述斑马鱼胚胎在发育囊胚期前进行暴露。 8.根据权利要求2所述的评价方法，其特征在于，所述斑马鱼成鱼进行毒性试验前，先对所述斑马鱼成鱼进行驯养；所述驯养为将斑马鱼成鱼在经曝气去氯处理，pH为7.0～8.5，溶氧量大于空气饱和值的80％，水质硬度为175～225mg/L，温度为26～28℃的水中驯养14天以上，所述驯养期间每天饲喂斑马鱼成鱼体重0.9～1.1％的饲料，并且每天更换30～35％的水。 9.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述斑马鱼仔鱼为胚胎孵化后3天，且能自主游动的斑马鱼；所述斑马鱼成鱼为体长为3.00～4.00cm，体重为0.15～0.30g的斑马鱼。 10.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述斑马鱼为野生斑马鱼。
所属类别：	发明专利