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原文传递一种D-葡萄糖的检测方法和应用

专利名称：	一种D-葡萄糖的检测方法和应用
摘要：	本发明提供了一种D‑葡萄糖的检测方法和应用，所述检测方法包括利用手性半胱氨酸封端的二氧化钼进行检测。本发明提供的检测方法利用手性半胱氨酸封端的二氧化钼与葡萄糖氧化酶(Gox)配合使用，可以实现对D‑葡萄糖的检测，对于其他非D‑葡萄糖的糖分子样品无响应，具有高的选择性；同时检测灵敏度高且D‑葡萄糖检测限(LOD)较低。
专利类型：	发明专利
申请人：	湖北大学
发明人：	程佳吉;王秋实;郝俊杰;林家颖
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T07:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T22:00:00+0805
申请号：	CN202010013434.0
公开号：	CN111189783A
代理机构：	北京品源专利代理有限公司
代理人：	巩克栋
分类号：	G01N21/19;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/19
申请人地址：	430062 湖北省武汉市武昌区友谊大道368号
主权项：	1.一种D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括利用手性半胱氨酸封端的二氧化钼进行检测。 2.根据权利要求1所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤： (1)绘制标准曲线； (2)将待测样品与手性半胱氨酸封端的二氧化钼混合，检测混合溶液的圆二色光谱； (3)通过步骤(2)中得到的圆二色光谱的CD峰绝对值，对应标准曲线，确定待测样品中D-葡萄糖的浓度。 3.根据权利要求2所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述标准曲线以D-葡萄糖的浓度为横坐标，以手性半胱氨酸封端的二氧化钼的圆二色光谱的CD峰绝对值为纵坐标。 4.根据权利要求2或3所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述标准曲线的绘制方法包括如下步骤： (A)分别配置不同浓度的D-葡萄糖溶液，所述D-葡萄糖溶液中包括葡萄糖氧化酶； (B)将D-葡萄糖溶液与手性半胱氨酸封端的二氧化钼混合，利用圆二色光谱检测手性半胱氨酸封端的二氧化钼的CD峰绝对值； (C)以D-葡萄糖的浓度为横坐标，以CD峰绝对值为纵坐标，绘制标准曲线。 5.根据权利要求4所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(A)所述D-葡萄糖溶液中D-葡萄糖的浓度为0-100000μM，优选200-1000μM；优选地，步骤(A)中至少配制3种以上不同浓度的D-葡萄糖溶液，进一步优选5种以上；优选地，所述D-葡萄糖溶液中，所述葡萄糖氧化酶的浓度为50-400U/mL。 6.根据权利要求4或5所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(B)中的混合溶液中，所述手性半胱氨酸封端的二氧化钼的浓度为0.1-100mmol/L，进一步优选10mmol/L；优选地，步骤(B)所述混合的时间为10-120min，进一步优选30min。 7.根据权利要求1-6中的任一项所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述手性半胱氨酸封端的二氧化钼包括L-半胱氨酸封端的二氧化钼和/或D-半胱氨酸封端的二氧化钼。 8.根据权利要求1-7中的任一项所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述手性半胱氨酸封端的二氧化钼的制备方法如下：利用手性半胱氨酸与三氧化钼反应，得到手性半胱氨酸封端的二氧化钼；优选地，所述手性半胱氨酸和所述三氧化钼的摩尔比为(50-200):3；优选地，所述反应包括超声5min后在避光反应下孵育1周；优选地，所述三氧化钼以溶液的形式参与反应；优选地，所述三氧化钼的制备方法包括如下步骤：将二硫化钼与过氧化氢混合反应，得到所述三氧化钼。 9.根据权利要求8所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述手性半胱氨酸包括L-半胱氨酸和/或D-半胱氨酸；优选地，所述手性半胱氨酸为L-半胱氨酸，所述手性半胱氨酸封端的二氧化钼为L-半胱氨酸封端的二氧化钼；优选地，所述手性半胱氨酸为D-半胱氨酸，所述手性半胱氨酸封端的二氧化钼为D-半胱氨酸封端的二氧化钼。 10.根据权利要求1-9中的任一项所述的D-葡萄糖的检测方法在生物体内活性氧自由基或多巴胺的检测中的应用。
所属类别：	发明专利