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原文传递恶性卡他热病毒的检测试剂盒、制备方法及其用途

专利名称：	恶性卡他热病毒的检测试剂盒、制备方法及其用途
摘要：	本发明涉及一种恶性卡他热病毒检测试剂盒及其制备方法与用途，属于牛传染病病毒的检测技术领域，具体包含具有恶性卡他热病毒单克隆抗体‑金微粒的缀合物与恶性卡他热病毒抗原的反应位点的结合物的条带，其能够与恶性卡他热病毒的核衣壳特异性结合，从而使诊断位置发生特异性变色；同时，将羊抗小鼠IgG抗体附着在条带上的预定位置以形成对照用控制线。测试线条带和控制线条带承载在吸收垫上，该吸收垫一端以斜切面接触的方式与样品垫结合，所述吸收垫和所述样品垫结合体附着在透明膜条带上，其中斜切面的切面角小于40°。该诊断试剂盒可以在农场采集牛的血样现场检测而无需专门的设备，可快速、准确地诊断牛恶性卡他热病毒抗原。
专利类型：	发明专利
申请人：	山东畜牧兽医职业学院
发明人：	朱伟;董建宝;高楠楠;索佳佳;袁东芳;杜燕
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T23:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010090280.5
公开号：	CN111208293A
代理机构：	青岛致嘉知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	李淑花
分类号：	G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543
申请人地址：	264061 山东省潍坊市胜利东街88号
主权项：	1.一种恶性卡他热病毒的检测试剂盒，其特征在于，包含具有恶性卡他热病毒单克隆抗体-金微粒缀合物与恶性卡他热病毒抗原的反应位点的结合物包被的测试线条带C和羊抗小鼠IgG抗体-金微粒缀合物包被的控制线条带T，所述测试线条带C和所述控制线条带T承载在吸收垫（2）上，所述吸收垫（2）一端以斜切面接触的方式与样品垫（1）结合，所述吸收垫（2）和所述样品垫（1）结合体附着在透明膜条带（3）上，所述斜切面的切面角∠a小于40°。 2.根据权利要求1所述的恶性卡他热病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述恶性卡他热病毒单克隆抗体为小鼠抗恶性卡他热病毒单克隆抗体；所述金微粒在530~540nm下的吸光度为10±1，直径为20nm至40nm。 3.根据权利要求1所述的恶性卡他热病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述测试线条带C和所述控制线条带T是由抗体-金微粒缀合物包被的硝酸纤维素膜线条形成，所述硝酸纤维素膜线条的径向横截面呈梯形且宽边内嵌于所述吸收垫中。 4.根据权利要求1所述的恶性卡他热病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述透明膜条带是由疏水性高分子材料制备的透明塑料薄膜，所述疏水性高分子材料包括PE、PP、PVC、PAN中的任意一种或多种的组合；所述样品垫为玻璃纤维或合成纤维制备的多孔滤材，孔径为0.5~0.8μm；所述吸收垫为选自由丙烯酸接枝聚丙烯、聚乳酸-聚乙二醇共聚物、聚乳酸-聚三亚甲基碳酸酯共聚物、聚乙二醇-聚己内酯共聚物中的任一种制备的白色膜材料，孔隙率为40%~60%。 5.根据权利要求1所述的恶性卡他热病毒的检测试剂盒，其特征在于，还包括由吸收垫进一步延展形成的承载垫和壳体（4），所述壳体包括样品口和视窗，在所述视窗与所述测试线和所述控制线对应的位置形成标记。 6.一种如权利要求1-5任一项所述恶性卡他热病毒的检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括分别将通过动物进行牛恶性卡他热病毒抗原免疫获得的单克隆抗体和山羊抗小鼠IgG抗体分别与金微粒原位结合形成缀合物；将抗体-金微粒缀合物分别包被于硝酸纤维素膜线条上形成金标线；将所述金标线嵌入吸收垫并裁切；将样品垫和吸收垫各自的斜切面叠加结合并固定于透明膜条带。 7.根据权利要求6所述的恶性卡他热病毒的检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述动物为小鼠；所述牛恶性卡他热病毒为通过牛睾丸细胞或Vero细胞培养并纯化获得；所述金微粒为将氯金酸进行还原制备。 8.根据权利要求6所述的恶性卡他热病毒的检测试剂盒的制备方法，其特征在于，还包括将制得的诊断条固定在壳体中的步骤。 9.一种如权利要求1-5任一项所述恶性卡他热病毒的检测试剂盒作为牛恶性卡他热病毒检测的应用，其特征在于，包括采集病牛血样加载到所述恶性卡他热病毒的检测试剂盒的样品垫并添加稀释剂进行稀释，静置5~10分钟后，观察检测视窗鉴别牛恶性卡他热病毒。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述稀释剂为0.01M-0.02M的磷酸盐缓冲液；所述血样滴量为2~3滴，所述稀释剂滴量为4~5滴。
所属类别：	发明专利