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原文传递一种败酱草有效成分检测与质量评价方法

专利名称：	一种败酱草有效成分检测与质量评价方法
摘要：	本发明公开了一种败酱草有效成分检测与质量评价方法，所述有效成分检测采用高效液相色谱‑质谱联用仪检测败酱草成分，质量评价方法采用高效液相色谱法检测所述败酱草成分，高效液相色谱条件包括：色谱柱：C18色谱柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05％磷酸水溶液，进行梯度洗脱；流速：1mL/min；柱温：30‑35℃；紫外检测波长：200‑400nm；本发明建立了败酱草HPLC指纹图谱的质量控制方法,通过系统聚类分析和相似度评价系统建立败酱草对照指纹图谱共有模式，采用指纹图谱的方法进行质量评价，可以方便判断药材的质量情况，且建立的败酱草药材指纹图谱方法稳定、可靠、重现性好。
专利类型：	发明专利
申请人：	安徽济人药业有限公司
发明人：	朱强;李翔宇;潘君;杨黎;王翔;张侠
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010197008.7
公开号：	CN111208253A
代理机构：	合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	杨润
分类号：	G01N30/88;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/88
申请人地址：	236800 安徽省亳州市工业园区
主权项：	1.一种败酱草有效成分检测方法，其特征在于，所述有效成分检测方法采用高效液相色谱-质谱联用仪检测败酱草成分，高效液相色谱条件如下：色谱柱：Diamonsil II C18色谱柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05％磷酸水溶液，进行梯度洗脱，流动相比例如下，其中流动相比例均为体积百分比： 0-25min，流动相A为10％-25％，流动相B为90％-75％； 25-40min，流动相A为25％-40％，流动相B为75％-60％； 40-50min，流动相A为40％-60％，流动相B为60％-40％； 50-58min，流动相A为60％-100％，流动相B为40％-0％； 58-65min，流动相A为100％-100％，流动相B为0％-0％；流速：1.0mL/min；柱温：30-35℃；紫外检测波长：200-600nm；所述质谱条件为：分流比：1:4，正负离子分别进行全扫描，扫描质量范围50～1200Da，干燥气的体积流量5-6L/min，干燥气温度160-180℃，雾化气压0.8Bar，阳离子模式下毛细管电压4500V，阴离子模式下的毛细管电压2600V，碎裂电压200Vpp，内标溶液选择甲酸钠溶液。 2.根据权利要求1所述的一种败酱草有效成分检测方法，其特征在于，所述检测方法，具体步骤如下： A1、取败酱草粉末1g，加入70％甲醇20mL置于圆底烧瓶中，称重，回流提取45min，放冷，称重，并用70％甲醇补重，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液得试样溶液； A2、精密吸取试样溶液10μL注入高效液相色谱-质谱联用仪，根据以下实验条件进行测定：色谱柱：Diamonsil II C18色谱柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05％磷酸水溶液，进行梯度洗脱；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；紫外检测波长：230nm；所述实验条件还包括质谱实验条件：分流比：1:4；正负离子分别进行全扫描，扫描质量范围50～1200Da，干燥气的体积流量6L/min，干燥气温度180℃，雾化气压0.8Bar，阳离子模式下毛细管电压4500V，阴离子模式下的毛细管电压2600V，碎裂电压200Vpp，内标溶液选择甲酸钠溶液。 3.根据权利要求2所述的一种败酱草有效成分检测方法，其特征在于，所述液相色谱-质谱联用谱图共检测出22种化合物，其中包括4个环烯醚萜类成分，2个香豆素类成分，5个黄酮苷类成分，6个木脂素类成分和4个三萜类成分。 4.一种败酱草质量评价方法，其特征在于，所述质量评价方法采用高效液相色谱法检测所述败酱草成分，其中，所述高效液相色谱法的条件包括：色谱柱：Orca C18色谱柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05％磷酸水溶液，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱程序如下，其中流动相比例均为体积百分比： 0-7min，流动相A为0％-7％，流动相B为100％-93％； 7-17min，流动相A为7％-14％，流动相B为93％-86％； 17-60min，流动相A为14％-35％，流动相B为86％-65％； 60-70min，流动相A为35％-45％，流动相B为65％-55％；流速：1mL/min；柱温：30-35℃；紫外检测波长：200-400nm。 5.根据权利要求3所述的一种败酱草有效成分检测与质量评价方法，其特征在于，所述败酱草质量评价方法，具体包括以下步骤： B1、将败酱草药材粉碎并过40目筛，取1g过筛后的粉末置于圆底烧瓶中，并加入70％甲醇20mL，称重，回流提取45min，冷却至室温，称重，用70％乙醇溶液补足失重，摇匀滤过，取续滤液，得供试溶液； B2、精密吸取供试溶液20μL注入高效液相色谱仪，根据以下色谱条件进行测定，得指纹图谱：色谱柱：Orca C18色谱柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05％磷酸水溶液，进行梯度洗脱；流速：1mL/min；柱温：35℃；紫外检测波长：230nm； B3、取15批败酱草药草通过B1、B2的方法建立指纹图谱，将指纹图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版相似度软件分析，确定8个主要的色谱特征峰，选取3号峰为参照峰，各峰相对3号峰的相对峰面积如下：相对峰面积：峰1：0.09-1.68，峰2：0.07-1.22，峰3：1.00，峰4：0.05-0.55，峰5：0.21-1.21，峰6：0.37-2.15，峰7：0.09-2.54，峰8：0.05-1.12； B4、使用“SPSS软件”对量化的峰面积进行聚类分析，并生成对照指纹图谱，使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004B版计算软件将样品与对照指纹图谱进行对比，得到相似度评价结果，使用相似度评价结果即可对败酱草药材进行质量评价。
所属类别：	发明专利