详情

原文传递一种红-黄-蓝三荧光发射传感器及其制备和应用

专利名称：	一种红-黄-蓝三荧光发射传感器及其制备和应用
摘要：	本发明属于分析化学以及快速检测领域，具体涉及一种红‑黄‑蓝三荧光发射传感器及其制备和在精确可视化检测碱性磷酸酶中的应用。传感器由二氧化锰纳米片、邻苯二胺、红色荧光量子点和缓冲液构成；或，传感器由二氧化锰纳米片、邻苯二胺、红色荧光量子点和含底物的缓冲液构成，其中底物为L‑抗坏血酸‑2‑磷酸。本发明红‑黄‑蓝三荧光发射传感器可在同一波长激发下，其三个不同波长的荧光针对活度逐渐增加的碱性磷酸酶表现出黄色荧光峰降低、红色荧光峰增强和蓝色荧光峰增强，整体荧光颜色变化为“黄色–橙色–红色–紫色”用于可视化检测目标物含量，也可通过测量三个不同发射波长处的荧光强度，以其强度变化为信号参量可测定目标物的含量。
专利类型：	发明专利
申请人：	中国科学院烟台海岸带研究所
发明人：	李金花;杨倩;陈令新;李登贞;李博伟;王晓艳;付龙文
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN201911393209.8
公开号：	CN111077124A
代理机构：	沈阳科苑专利商标代理有限公司
代理人：	何薇;李颖
分类号：	G01N21/64;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/64
申请人地址：	264003 山东省烟台市莱山区春晖路17号
主权项：	1.一种红-黄-蓝三荧光发射传感器，其特征在于：传感器由二氧化锰纳米片、邻苯二胺、红色荧光量子点和缓冲液构成；或，传感器由二氧化锰纳米片、邻苯二胺、红色荧光量子点和含底物的缓冲液构成，其中底物为L-抗坏血酸-2-磷酸。 2.按权利要求1所述的红-黄-蓝三荧光发射传感器，其特征在于：所述每1mL传感器中各物质用量为0.07–0.09mg二氧化锰纳米片，14–16μmol邻苯二胺，19–21μL红色荧光量子点，95–105μL磷酸缓冲液；或，所述每1mL传感器中各物质用量为0.07–0.09mg二氧化锰纳米片，14–16μmol邻苯二胺，9–11μL红色荧光量子点，95–105μL含底物的磷酸缓冲液，其中，磷酸缓冲液为0.1mol·L-1，pH 8.0，含有0.9–1.1μmol L-抗坏血酸-2-磷酸。 3.按权利要求1或2所述的红-黄-蓝三荧光发射传感器，其特征在于：所述二氧化锰纳米片为通过2-吗啉乙磺酸超声还原高锰酸钾4–6分钟，反应后将产物用离心法沉淀，弃上清液，用超纯水洗涤沉淀5–7次，得到具有二维片状结构的二氧化锰纳米片；其中，2-吗啉乙磺酸浓度为80–120mmol·L-1，pH为5.8–6.2；高锰酸钾浓度为8–12mmol·L-1；2-吗啉乙磺酸与高锰酸钾用量体积比为5:4–7:5。 4.按权利要求1或2所述的红-黄-蓝三荧光发射传感器，其特征在于：所述红色荧光量子点为碲化镉/硫化锌(CdTe/ZnS)量子点。 5.一种权利要求1所述的红-黄-蓝三荧光发射传感器的应用，其特征在于：所述缓冲液内含L-抗坏血酸-2-磷酸的传感器，在精确可视化定性/定量检测碱性磷酸酶中的应用；或，所述传感器在精确可视化定性/定量检测抗坏血酸中的应用。 6.一种可视化定性/定量检测碱性磷酸酶的方法，其特征在于：利用传感器内底物与待检测样品中碱性磷酸酶的催化反应，产生产物抗坏血酸使二氧化锰纳米片催化活性变化，进而影响二氧化锰纳米片与邻苯二胺的反应程度，以及邻苯二胺被还原的程度，所呈现出“黄色–橙色–红色–紫色”的不同变化，实现对目标物碱性磷酸酶的精确可视化检测。 7.按权利要求6所述的可视化定性/定量检测碱性磷酸酶的方法，其特征在于：所述待测样品中无碱性磷酸酶时，传感器内的二氧化锰纳米片催化邻苯二胺的氧化反应，生成黄色荧光邻苯二胺氧化物并猝灭量子点的红色荧光，传感器显示为黄色荧光；所述待测样品中待碱性磷酸酶含量少时，待测物与底物的去磷酸化反应生成抗坏血酸，抗坏血酸将二氧化锰纳米片还原为二价锰离子并失去类氧化酶特性，使邻苯二胺的氧化反应减弱，生成的邻苯二胺氧化物黄色荧光逐渐减少，量子点红色荧光恢复，传感器逐步从原来的黄色荧光转变为橙色，最终转变为红色荧光；所述待测样品中碱性磷酸酶含量高时，待测物与底物的去磷酸化反应生成抗坏血酸增多，反应产物抗坏血酸完全还原二氧化锰纳米片并逐渐还原邻苯二胺生成蓝色荧光产物，量子点红色荧光保持不变，传感器进一步从红色荧光转变为紫色荧光。 8.按权利要求6所述的方法，其特征在于：所述待测样品中含有碱性磷酸酶时，碱性磷酸酶在35–40℃水浴条件下催化传感器中L-抗坏血酸-2-磷酸去磷酸化生成抗坏血酸，催化反应时间为55–65分钟。 9.按权利要求6所述的方法，其特征在于：所述碱性磷酸酶与底物的催化产物抗坏血酸与二氧化锰纳米片混合反应8–12分钟后，加入邻苯二胺，并38–42℃水浴条件下催化邻苯二胺的氧化反应，催化反应时间为55–65分钟。
所属类别：	发明专利