详情

原文传递胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒和方法及剑麻皂素的应用

专利名称：	胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒和方法及剑麻皂素的应用
摘要：	本发明公开了一种胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒、胶乳增强竞争免疫比浊检测方法及剑麻皂素的应用。所述胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒包括试剂R1与试剂R2，所述试剂R1包含目标检测物‑载体复合物和剑麻皂素，所述试剂R2包含抗目标检测物抗体偶联的乳胶微球。本发明的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒具有优异的准确度和稳定性，可与金标准HPLC检测值高度一致。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	上海云泽生物科技有限公司
发明人：	曹广源;吴冯波
专利状态：	有效
申请日期：	2020-12-30T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-11T00:00:00+0800
申请号：	CN202011616064.6
公开号：	CN114167063A
代理机构：	上海弼兴律师事务所
代理人：	王卫彬;黄益澍
分类号：	G01N33/68;G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/543
申请人地址：	201112 上海市闵行区新骏环路760号10幢301、302-1、401-1室
主权项：	1.一种胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，其包括试剂R1与试剂R2，所述试剂R1包含目标检测物-载体复合物和剑麻皂素，所述试剂R2包含抗目标检测物抗体偶联的乳胶微球。 2.如权利要求1所述的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述剑麻皂素在所述试剂R1中的浓度为0.1-1.0wt％，优选为0.4-0.8wt％，更优选为0.6wt％。 3.如权利要求1所述的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述目标检测物为泊沙康唑；和/或，所述目标检测物-载体复合物为泊沙康唑-牛血清蛋白；和/或，所述目标检测物-载体复合物在所述试剂R1中的浓度为200-600ng/ml，优选为300-500ng/ml。 4.如权利要求1所述的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述乳胶微球为表面含氨基的聚苯乙烯乳胶微球、或表面含羧基的聚苯乙烯乳胶微球；所述表面含羧基的聚苯乙烯乳胶微球的平均粒径优选为70-470nm，更优选为150-350nm，进一步优选为200nm或240nm；所述表面含羧基的聚苯乙烯乳胶微球的表面羧基密度优选为0.03-0.30mmol/g，更优选为0.05-0.18mmol/g，进一步优选为0.1mmol/g或0.134mmol/g；和/或，所述抗目标检测物抗体偶联的乳胶微球在所述试剂R2中的的浓度为0.05-0.16wt％，优选为0.09-0.13wt％。 5.如权利要求1所述的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1和所述试剂R2为缓冲溶液，所述缓冲溶液中的缓冲剂选自下述任一试剂与其共轭酸或其共轭碱组成的缓冲对：2-(N-吗啡啉)乙磺酸、三羟甲基氨基甲烷、3-(N-吗啡代)丙烷磺酸、三乙醇胺和二乙醇胺；所述缓冲溶液的pH优选为5.0-9.0，更优选为5.5-7.5；所述缓冲剂的浓度优选为15-100mM；和/或，所述缓冲溶液包含下述碱金属盐中的一种或多种：Na2HPO3、NaH2PO3、NaCl、KCl、K2HPO3和KH2PO3；所述碱金属盐的浓度优选为0.1-0.2mol/L，更优选为0.14-0.18mol/L。 6.如权利要求5所述的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲溶液中包含稳定剂、封闭剂和防腐剂中的一种或多种；所述稳定剂优选D-海藻糖和/或蔗糖；所述防腐剂优选Proclin 300和/或叠氮钠；所述封闭剂优选选自牛血清蛋白、CE210和CE510中一种或多种。 7.如权利要求1-6任一项所述的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包含甲醇；所述甲醇在所述试剂R1中的的浓度优选为5-20vol％，更优选为10vol％；和/或，所述胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒还包含目标检测物的标准品。 8.如权利要求1所述的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒包括试剂R1和试剂R2：所述试剂R1包括MES-NaOH缓冲溶液、牛血清蛋白、NaCl、D-海藻糖、剑麻皂素、甲醇、叠氮钠和泊沙康唑-载体复合物，所述试剂R2包括HEPES-HCl缓冲溶液、封闭剂、NaCl、D-海藻糖、叠氮钠、牛血清蛋白和抗泊沙康唑抗体偶联的乳胶微球；优选地，所述胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒包括试剂R1和试剂R2：所述试剂R1包括20-30mM MES-NaOH缓冲溶液、0.08-0.12wt％牛血清蛋白、0.14-0.18mol/L NaCl、0.08-0.12wt％D-海藻糖、0.1-1.0wt％剑麻皂素、5-20vol％甲醇、0.08-0.12wt％叠氮钠和0.2-0.6μg/ml泊沙康唑-载体复合物，所述试剂R1的pH为5.5-6.0，所述试剂R2包括48-52mM HEPES-HCl缓冲溶液、0.08-0.12vol％CE510、0.14-0.18mol/L NaCl、0.08-0.12wt％D-海藻糖、0.08-0.12wt％叠氮钠、0.08-0.12wt％牛血清蛋白和0.09-0.13wt％抗泊沙康唑抗体偶联的聚苯乙烯乳胶微球，所述试剂R2的pH为7.4-7.8；更优选地，所述胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒包括试剂R1和试剂R2：所述试剂R1包括25mM MES-NaOH缓冲溶液、0.1wt％牛血清蛋白、0.17mol/L NaCl、0.1wt％D-海藻糖、10vol％甲醇、0.1wt％叠氮钠、0.4μg/ml泊沙康唑-牛血清蛋白复合物和0.6wt％剑麻皂素，试剂R1的pH为5.65，所述试剂R2包括50mM HEPES-HCl缓冲溶液、0.1vol％CE510、0.17mol/L NaCl、0.1wt％D-海藻糖、0.1wt％叠氮钠、0.1wt％牛血清蛋白和0.11wt％抗泊沙康唑抗体偶联的聚苯乙烯乳胶微球，所述试剂R2的pH为7.6。 9.剑麻皂素作为助剂在制备如权利要求1-8任一项所述的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒中的应用。 10.一种胶乳增强竞争免疫比浊检测方法，其使用如权利要求1-8任一项所述的胶乳增强竞争免疫比浊检测试剂盒进行检测。
所属类别：	发明专利