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原文传递组织金属蛋白酶抑制剂-2胶乳免疫比浊法血尿同检试剂盒

专利名称：	组织金属蛋白酶抑制剂-2胶乳免疫比浊法血尿同检试剂盒
摘要：	本发明公开了组织金属蛋白酶抑制剂‑2胶乳免疫比浊法血尿同检试剂盒，属于免疫分析技术领域。该试剂盒包括试剂R1、试剂R2、高值校准品、质控品和0值校准品(可同时作为校准品稀释液)；其中，所述试剂R1包括增敏剂、表面活性剂、金属盐、牛血清白蛋白；所述试剂R2包括组织金属蛋白酶抑制剂‑2抗体包被的胶乳颗粒；所述高值校准和质控品包括组织金属蛋白酶抑制剂‑2(TIMP‑2)抗原；所述0值校准品包括功能性分子。该试剂盒与市售ELISA试剂盒相比，灵敏度更高，线性范围更宽，结合全自动生化分析仪可简便、快速实现血样和尿液样本中人组织金属蛋白酶抑制剂‑2(TIMP2)浓度的定量检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京利德曼生化股份有限公司
发明人：	孙娜;张丽
专利状态：	有效
申请日期：	2021-12-09T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-18T00:00:00+0800
申请号：	CN202111499111.8
公开号：	CN114200129A
代理机构：	天津翰林知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	付长杰
分类号：	G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/543
申请人地址：	100176 北京市大兴区经济技术开发区兴海路5号
主权项：	1.一种组织金属蛋白酶抑制剂-2胶乳免疫比浊法血尿同检试剂盒，该试剂盒包括试剂R1、试剂R2、0值校准品、高值校准品和质控品，所述试剂R1包括：缓冲液、增敏剂、表面活性剂、金属盐、牛血清白蛋白和防腐剂；所述试剂R2包括：缓冲液、组织金属蛋白酶抑制剂-2抗体包被的胶乳颗粒、防腐剂和助悬剂；其特征在于，所述0值校准品中包括有缓冲液、防腐剂、保护剂和能使0值处的反应度降低，提高血清和尿液样本检测空白限的准确性的功能性分子；高值校准品中加入有组织金属蛋白酶抑制剂-2抗原，以0值校准品作为高值校准品稀释液。 2.根据权利要求1所述血尿同检试剂盒，其特征在于，所述R1试剂中金属盐的质量百分浓度大于增敏剂的质量百分浓度，金属盐与增敏剂的质量百分浓度的比例为2:1～10:1，更优选地，金属盐与增敏剂的质量百分浓度的比例为3.3:1。 3.根据权利要求2所述血尿同检试剂盒，其特征在于，所述金属盐为氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙中的至少一种，质量百分浓度为0.5％～3％；更优选地，使用氯化镁作为金属盐，质量百分浓度为1.0％；所述增敏剂选自聚乙二醇系列、葡聚糖系列或聚乙烯吡咯烷酮系列，质量百分浓度为0.05％～0.50％，更优选地，增敏剂为聚乙二醇8000，质量百分浓度为0.3％；增敏剂为葡聚糖系列时，质量百分浓度为0.1％。 4.根据权利要求1所述血尿同检试剂盒，其特征在于，获得高值校准品，以0值校准品作为中间浓度血清样本校准品和尿液样本校准品制备时的校准品稀释液。 5.根据权利要求1所述血尿同检试剂盒，其特征在于，所述功能性分子为氯化胆碱或甘露醇，质量百分浓度为0.5％～5.0％；更优选地，使用功能性分子为氯化胆碱，质量百分浓度为2.0％。 6.根据权利要求1所述血尿同检试剂盒，其特征在于，所述R1试剂中的牛血清白蛋白的质量百分浓度为0.5％～4.0％，优选牛血清白蛋白的质量百分浓度为2.0％。 7.根据权利要求1所述血尿同检试剂盒，其特征在于，所述组织金属蛋白酶抑制剂-2抗体包被的胶乳颗粒中，组织金属蛋白酶抑制剂-2抗体与羧基微球的质量比例为1:50～1:200；更优选地，组织金属蛋白酶抑制剂-2抗体与羧基微球的质量比例为1:100～1：150；所述组织金属蛋白酶抑制剂-2抗体为单克隆抗体或多克隆抗体，浓度为0.01g/L～0.2g/L，更优选地，使用组织金属蛋白酶抑制剂-2抗体为兔抗人多克隆抗体，浓度为0.05g/L；包被组织金属蛋白酶抑制剂-2抗体的胶乳微球为羧基微球，粒径100nm～300nm，浓度为1g/L～15g/L，包被方法为化学键交联法；更优选地，使用羧基微球，粒径为110nm～120nm，浓度为4g/L～6g/L。 8.根据权利要求1所述血尿同检试剂盒，其特征在于，试剂R1、试剂R2、0值校准品、高值校准品、质控品中的缓冲液均选自磷酸盐缓冲液、HEPES缓冲液、Tris-HCl缓冲液、MES缓冲液、MOPS缓冲液和TAPS缓冲液中的一种，缓冲液pH值为6.0～9.0；防腐剂选自叠氮化钠和Procline300中的一种，所述防腐剂的质量百分比浓度为0.1％～0.3％；所述试剂R1中表面活性剂选自吐温系列、司盘系列、曲拉通系列，质量百分浓度为0.1％～0.8％；所述试剂R2中的助悬剂包括蔗糖、牛血清白蛋白、丙三醇、海藻糖中的一种或任意几种混合；保护剂为蔗糖、牛血清白蛋白、海藻糖中的一种或任意几种混合。 9.根据权利要求1所述血尿同检试剂盒，其特征在于，所述试剂R2组织金属蛋白酶抑制剂-2抗体包被的胶乳颗粒的制备过程是： (1)胶乳微球的活化： (a)分别将粒径为110nm～150nm的胶乳微球颗粒用MES缓冲液PH6.0稀释到终浓度1g/L～15g/L，充分搅拌； (b)在(a)的体系中加入EDC，使EDC/胶乳微球的质量比为(0.2～1):1，充分搅拌； (c)在(b)的体系中中加入NHS，使NHS/EDC的质量比为(0.5～5):1，充分搅拌，室温反应0.5h～5h； (2)抗体的包被： (d)组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)抗体用PH7.2 MOPS缓冲液稀释，充分搅拌； (e)将(d)中活化的羧基微球，边搅拌边缓慢的加入组织金属蛋白酶抑制剂-2抗体中，充分搅拌，TIMP-2抗体的终浓度为0.01g/L～0.2g/L； (f)室温条件下，过夜反应； (3)封闭：室温过夜反应后，在上述溶液中加入BSA，终质量百分浓度为0.2％～2％，室温搅拌封闭0.5h～5h； (4)离心封闭后的试剂，进行离心，10000g～20000g，4℃条件下，离心20min～90min；去除上清，用试剂R2的缓冲液溶解离心去除上清后的沉淀，使其终浓度为2g/L～10g/L； (5)超声离心重悬后的胶乳微球，超声分散后置于2℃～8℃备用。 10.根据权利要求1所述血尿同检试剂盒，其特征在于，所述试剂盒能达到下述指标：线性检测范围：血液模式5ng/mL～600ng/mL；尿液模式：5ng/mL～150ng/mL 空白限：空白限不高于2ng/mL 精密度：批内变异系数小于±10％，批间变异系数小于±15％抗干扰：胆红素浓度≤500μmol/L、乳糜浓度≤0.3％、血红蛋白浓度≤2g/L对试剂盒检测无干扰；稳定性：试剂各组分置2℃～8℃12个月和37℃7天后测定结果均符合要求，试剂盒效期能达12个月。
所属类别：	发明专利