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原文传递 GFAP和CNTN1在制备用于胶质母细胞瘤早期筛查和早期诊断试剂盒中的应用
专利名称: GFAP和CNTN1在制备用于胶质母细胞瘤早期筛查和早期诊断试剂盒中的应用
摘要: 本发明提供GFAP和CNTN1在制备用于胶质母细胞瘤早期筛查和早期诊断试剂盒中的应用。所述试剂盒含有两种血清蛋白质标志物,分别为GFAP和CNTN1。所述的ELISA试剂盒由以下部分组成:(1)96孔酶标板,(2)酶结合物工作液,(3)显色液底物,(4)洗涤液,(5)结合物稀释液,(6)终止液,(7)GFAP和CNTN1标准蛋白。GFAP和CNTN1是脑胶质瘤一对较好的检测指标,对于胶质母细胞瘤的早期筛查和早期诊断,具有特别重要的作用和临床应用价值。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 河北;13
申请人: 河北医科大学第二医院
发明人: 薛晓英;周欢娣;侯柳冰;韩雪涛;王洪;苏琳琳;孙微;高琪;张东东
专利状态: 有效
申请日期: 2021-11-30T00:00:00+0800
发布日期: 2022-03-01T00:00:00+0800
申请号: CN202111441352.7
公开号: CN114113609A
代理机构: 北京德和衡律师事务所
代理人: 李国聪;甄伊宁
分类号: G01N33/574;G01N33/58;G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/574;G01N33/58;G01N33/543
申请人地址: 050000 河北省石家庄市和平西路215号
主权项: 1.GFAP和CNTN1在制备用于胶质母细胞瘤早期筛查和早期诊断试剂盒中的应用。 2.一种用于脑胶质瘤早期筛查和诊断的ELISA试剂盒,所述试剂盒含有两种血清蛋白质标志物,分别为GFAP和CNTN1。 3.如权利要求2所述的ELISA试剂盒,其特征在于所述ELISA试剂盒由以下部分组成:(1)96孔酶标板,(2)酶结合物工作液,(3)显色液底物,(4)洗涤液,(5)结合物稀释液,(6)终止液,(7)GFAP和CNTN1标准蛋白。 4.如权利要求3所述的ELISA试剂盒,其特征在于所述(7)中的GFAP和CNTN1标准蛋白为人GFAP和CNTN1标准蛋白,分别含有人GFAP重组蛋白冻干粉400ng和CNTN1标准蛋白冻干粉10ng。 5.如权利要求2-4中任一项所述的ELISA试剂盒,其特征在于所述(7)中的所述GFAP标准蛋白购自abcam,所述CNTN1标准蛋白购自Novus。 6.使用如权利要求2-5中任一项所述ELISA试剂盒早期筛查和早期诊断胶质母细胞瘤的方法,其特征在于所述方法含有如下步骤: (1)包被:将50uL待检测血清样本或标准品溶液分别加入96孔板,并向每个孔中加入50uL GFAP或CNTN1抗体,室温下,在平板摇动器上孵育; (2)封闭:密封平板,在室温下,在平板摇动器上孵育; (3)冲洗:将350uL洗涤液加入到每个孔中,停留至少10秒钟,清洗完毕后,翻转孔板,用干净纸巾轻轻拍打,去除多余的液体,可选地重复1-3次; (4)显色:向每个孔中加入100uL TMB显影液,并在平板摇动器上遮光显色,然后向每个孔中加入100uL终止液,并在平板摇动器上摇动平板; (5)标准曲线:根据标准品OD值绘制标准曲线,在标准曲线上查出待检样本的含量; (6)数据统计。 7.如如权利要求6所述的方法,其特征在于所述方法含有如下步骤: (1)包被:将50uL待检测血清样本或标准品溶液分别加入96孔板,并向每个孔中加入50uL GFAP或CNTN1抗体,室温下,在设定为400转/分的平板摇动器上孵育2小时; (2)封闭:密封平板,在室温下,在设定为400转/分的平板摇动器上孵育1小时; (3)冲洗:将350uL洗涤液加入到每个孔中,停留至少10秒钟,清洗完毕后,翻转孔板,用干净纸巾轻轻拍打,去除多余的液体,重复3次; (4)显色:向每个孔中加入100uL TMB显影液,并在设定为400转/分的平板摇动器上遮光显色10分钟,然后向每个孔中加入100uL终止液,并在平板摇动器上摇动平板1分钟; (5)标准曲线:根据标准品OD值(450nm)绘制标准曲线,在标准曲线上查出待检样本的含量; (6)数据统计:所有的统计均使用GraphPad Prism 8软件包,P<0.05被认为具有统计学意义。
所属类别: 发明专利
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