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原文传递一种结合QuEChERS和柱前衍生前处理测定烟叶中抗蚜威农药残留的方法

专利名称：	一种结合QuEChERS和柱前衍生前处理测定烟叶中抗蚜威农药残留的方法
摘要：	本发明属于食品安全检测领域，本发明公开了一种结合QuEChERS和柱前衍生前处理测定烟叶中抗蚜威农药残留的方法，具体是烟叶经过提取和QuEChERS净化后，进行柱前衍生，取衍生化合物用液相色谱检验检测，对于复杂基质的抗干扰能力强，方法灵敏度高，准确性和重复性好，前处理更便捷的检测方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	贵州;52
申请人：	贵州省产品质量检验检测院
发明人：	王焕琦;王正强;杨金川
专利状态：	有效
申请日期：	2022-06-24T00:00:00+0800
发布日期：	2022-12-02T00:00:00+0800
申请号：	CN202210732114.X
公开号：	CN115420813A
代理机构：	北京博海嘉知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	郝彦东
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
申请人地址：	550016 贵州省贵阳市白云区科教街698号
主权项：	1.一种结合QuEChERS和柱前衍生前处理测定烟叶中抗蚜威农药残留的方法，其特征在于：先将烟叶样品用1％(v/v)乙酸乙腈溶液震荡提取后，通过QuEChERS前处理除去杂质，取除杂后的前处理液在高温强碱(NAOH)条件下水解，样品水解后与.OPA/2-巯基乙醇溶液发生衍生化反应，生成具有强荧光吸收的异氮(杂)茚基衍生物，使用高效液相色谱仪-荧光检测器检测。具体包括以下步骤：步骤1：烟叶样品震荡提取：称取10.00g均质完毕样品(市售烟叶)于50ml离心管中，加入1％(v/v)乙酸乙腈溶液10ml和2-3g NaCl后，振荡提取10min后，于9500r/min离心5min。步骤2：QuEChERS净化：取上层清液5mL于预先加有200mg PSA和900mg无水硫酸镁(MgSO4)的离心管中，涡旋提取15s，在9500r/min离心5min，取上层提取液2.0ml于试管中，氮气浓缩至近干。步骤3：柱前衍生过程：取净化好的前处理液，分别加入(pH＝3)酸化水溶液500μl、250μlOPA/2-巯基乙醇溶液和250μl0.05 mol/L氢氧化钠水溶液涡旋1min溶解，经0.2μm微孔膜过滤于进样小瓶中,用(pH＝3)酸化水溶液定容1ml，80℃避光水浴加热30min后，衍生完成。步骤4、高效液相色谱-荧光检测器(HPLC-FLD)分析检测。 2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤1中，所述的震荡提取方法，包括：提取液通过以下方法制备得到：取1ml乙酸溶于100ml乙腈中得到1％(v/v)乙酸乙腈溶液，Nacl的添加量为2-3g。 3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤2中，所述的QuEChERS净化，包括：QuEChERS净化包的吸附剂填料种类和比例为：PSA 200mg+MgSO4900 mg作为净化吸附剂。 4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤3中，所述的柱前衍生过程包括：(pH＝3)酸化水溶液通过以下方法制备得到：用HCl将500ml净水酸化到pH＝3，并用已校正的pH计进行测定。 5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤3中，所述的柱前衍生过程包括：0.05mol/L硼酸钠水溶液通过以下方法制备得到：称取19.1g Na2B4O7·10H2O，完全溶解于1L水中。溶解过程可能会将近1小时。 6.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤3中，所述的柱前衍生过程包括：氢氧化钠水溶液通过以下方法制备得：称取片状NaOH 1g于500mL容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，混合均匀。用0.45μm的滤膜过滤并脱气，滤液储存于棕色瓶中。 7.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤3中，所述的柱前衍生过程包括：OPA/2-巯基乙醇溶液通过以下方法制备得：取50mg OPA试剂于5mL甲醇中，缓慢旋转使其完全溶解后，转移至一个500mL的容量瓶中，用硼酸钠溶液稀释到刻度并混合均匀，用0.45μm的滤膜过滤并脱气。然后，加入0.5mL 2－巯基乙醇，缓慢旋转直至混合均匀。一旦2-巯基乙醇加入后，切勿再将溶液脱气，将此溶液置于一个密闭的棕色玻璃储液瓶中，用铝箔包裹避光保存。 8.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤3中，所述的柱前衍生过程包括：氢氧化钠水溶液的添加量为250ul,OPA/2-巯基乙醇溶液的添加量为250ul.衍生化温度和时间为80℃避光水浴加热30min后。 9.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤4中，HPLC-FLD分析检测，包括： (1)色谱条件如下：EXTEND-C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；柱温：30℃，进样体积：400μl，流速：1.0ml/min，FLD检测器：激发波长：339nm；发射波长：445nm；增益：10，流动相：A相为纯水，B相为色谱甲醇，C相为色谱乙腈，梯度洗脱程序：0-5.3min,88％A，12％B，5.3-14min,88-68％A，12-16％B，0-16％C，14-18min，68-50％A，16-25％B，16-25％C，20-30min，50-88％A，25-12％B，25-0％C。