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原文传递一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法

专利名称：	一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法
摘要：	本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种运用高效液相色谱检测罗沙司他12种杂质分离的方法：用十八烷基键合硅胶为填充剂的反相液相色谱柱，以磷酸水溶液与乙腈混合溶液为流动相A，乙腈为流动相B，设置柱温、流速及检测波长，梯度洗脱。本发明首次公开了罗沙司他的12种杂质分离检测方法，该检测方法可以用作罗沙司他的质量控制，该法专属性强、线性关系好，各组分之间的分离度不小于1.5，对罗沙司他的12种杂质分离的检测具有积极的效果和实际应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京科默生物医药有限公司
发明人：	张静;孙井龙;王慧敏;徐良松;张孝清
专利状态：	有效
申请日期：	2023-07-24T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-21T00:00:00+0800
申请号：	CN202310907025.9
公开号：	CN117092261A
分类号：	G01N30/06;G01N30/74;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/06;G01N30/74
申请人地址：	210023 江苏省南京市栖霞区仙林大学城纬地路9号B4-2幢
主权项：	1.一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）样品溶液配制： a. 供试品溶液：避光操作，精密称取罗沙司他10mg，置25ml棕色量瓶中，加乙腈-水溶解并定量稀释至刻度，摇匀； b. 系统适用性溶液：精密称取罗沙司他及各杂质对照品，加乙腈-水溶解并定量稀释制成每1ml中分别含罗沙司他0.4mg，杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质SM1、杂质IN1、杂质IN2、杂质IN3、杂质IN4各0.6μg的混合溶液；（2）测定法：精密量取上述溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；色谱条件：用十八烷基键合硅胶为填充剂的反相液相色谱柱，以磷酸水溶液与乙腈混合溶液为流动相A，乙腈为流动相B，设置柱温，流速及检测波长，梯度洗脱。 2.根据权利要求1所述的一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述步骤（2）流动相A中磷酸水溶液与乙腈的体积比选自95:5。 3.根据权利要求2所述的一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述步骤（2）流动相A中磷酸水溶液选自pH为2.0~4.5的20mmol/L磷酸二氢钾溶液、0.05%磷酸溶液。 4.根据权利要求3所述的一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述步骤（2）流动相A中磷酸水溶液选自0.05%磷酸溶液。 5.根据权利要求1所述的一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述的反相液相色谱柱选自HORIZON Aurashell C18，规格为1004.6mm，2.7μm、菲罗门Titank C18，规格为1504.6mm，3μm、ACE Excel 3 Super C18规格为150*4.6mm，3μm、YMC Triart C18，规格为4.6mm×150mm，3μm。 6.根据权利要求5所述的一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述的色谱柱选自YMC Triart C18，规格为4.6mm×150mm，3μm。 7.根据权利要求1所述的一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述的柱温选自33-37℃，流速选自0.9-1.1ml/min，检测波长选自220nm。 8.根据权利要求7所述的一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述的柱温选自35℃，流速选自1.0ml/min。 9.根据权利要求1-8任一项所述的一种罗沙司他12种杂质分离的高效液相色谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述的梯度洗脱为：以流动相A 70%，流动相B 30%开始洗脱，逐渐减少流动相A比例，增加流动相B比例，至8min将流动相A比例调整至50%，流动相B比例调整至50%，持续洗脱至25min，继续逐渐降低流动相A比例，增加流动相B比例，至45min，流动相A调整至15%，流动相B调整至85%，逐渐增加流动相A比例，降低流动相B比例，至46min后，流动相A调整至70%，流动相B调整至30%，保持该流动相比例继续洗脱至55min。