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原文传递固体载体上的官能团的定量

专利名称：	固体载体上的官能团的定量
摘要：	本文描述了定量固定化在固体载体上的官能团的量的方法。该方法能够测定在固体载体上是否提供了足够的官能团以连接用于检测目标被分析物的第一结合对成员。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	美国;US
申请人：	西门子医疗保健诊断公司
发明人：	S.林;C.里默;R.斯皮尔斯
专利状态：	有效
申请日期：	2016-03-10T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-10T00:00:00+0800
申请号：	CN202311013439.3
公开号：	CN117031013A
代理机构：	中国专利代理(香港)有限公司
代理人：	周铁;杨思捷
分类号：	G01N33/543;G01N33/531;G01N33/52;G01N33/536;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/543;G01N33/531;G01N33/52;G01N33/536
申请人地址：	美国纽约州
主权项：	1.定量固定化在包含一种或多种顺磁粒子的固体载体上的目标官能团的方法，该方法包括以下步骤： (a)使所述固定化在一种或多种顺磁粒子上的目标官能团与一定量的选择性化合物接触，其中一定量的选择性化合物直接结合到所述目标官能团上并形成结合选择性化合物，并且一定量的选择性化合物没有结合到所述目标官能团上并以未结合选择性化合物的形式存在，其中所述目标官能团包含醛类官能团，并且其中所述选择性化合物包含丙胺； (b)获得具有一定量的未结合选择性化合物的副产物； (c)将指示剂添加到所述副产物中，其结合到所述副产物中的未结合选择性化合物上以提供比色结果，其中所述指示剂包含含有2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBSA)的溶液； (d)测量所述比色结果； (e)由所述测量结果测定所述副产物中的未结合选择性化合物的量； (f)由未结合选择性化合物的量测定固定化在所述一种或多种顺磁粒子上的结合选择性化合物的量；和 (g)由固定化选择性化合物的量测定固定化在所述一种或多种顺磁粒子上的目标官能团的量；和 (h)使顺磁粒子与有效量的第一结合对成员反应，以使第一结合对成员与顺磁粒子连接，其中基于步骤(g)中测定的固定化在顺磁粒子上的目标官能团的量确定所述第一结合对成员的有效量，并且其中第二结合对成员是样品中的目标被分析物。 2.权利要求1所述的方法，其中所述醛类官能团通过将醛类官能团添加到所述一种或多种顺磁粒子上存在的氨基上的反应固定化在所述一种或多种顺磁粒子上。 3.权利要求2所述的方法，其中所述醛类官能团通过戊二醛与所述一种或多种顺磁粒子上的氨基之间的反应固定化在所述一种或多种顺磁粒子上。 4.权利要求1所述的方法，其中在键合到所述一种或多种顺磁粒子上的连接剂上提供所述目标官能团。 5.权利要求1所述的方法，其进一步包括，在步骤(h)之前：如果所述一种或多种顺磁粒子上的测定的目标官能团数小于预定值，制造包含固定化在一种或多种顺磁粒子上的附加目标官能团的附加的一种或多种顺磁粒子。 6.权利要求1所述的方法，其中所述第一结合对成员的有效量为化学计算量。 7.权利要求1所述的方法，其中所述第一结合对成员是抗原、抗体、酶、底物或多核苷酸。 8.权利要求1所述的方法，其中使所述目标官能团与一定量的选择性化合物接触包括使所述目标官能团与一定量的选择性化合物反应。 9.定量固定化在包含一种或多种顺磁粒子的固体载体上的目标官能团的方法，该方法包括以下步骤： (a)使所述固定化在一种或多种顺磁粒子上的目标官能团与一定量的选择性化合物接触，其中一定量的选择性化合物直接结合到所述目标官能团上并形成结合选择性化合物，并且一定量的选择性化合物没有结合到所述目标官能团上并以未结合选择性化合物的形式存在，其中所述目标官能团包含氨基官能团，并且其中所述选择性化合物包含选择性地与所述一种或多种顺磁粒子上的固定化氨基官能团反应的醛类化合物； (b)获得具有一定量的未结合选择性化合物的副产物； (c)将指示剂添加到所述副产物中，其结合到所述副产物中的未结合选择性化合物上以提供比色结果，其中所述指示剂包含4-氨基-3-肼基-5-巯基-1,2,4-三唑； (d)测量所述比色结果； (e)由所述测量结果测定所述副产物中的未结合选择性化合物的量； (f)由未结合选择性化合物的量测定固定化在所述一种或多种顺磁粒子上的结合选择性化合物的量；和 (g)由固定化选择性化合物的量测定固定化在所述一种或多种顺磁粒子上的目标官能团的量；和 (h)使顺磁粒子与有效量的第一结合对成员反应，以使第一结合对成员与顺磁粒子连接，其中基于步骤(g)中测定的固定化在顺磁粒子上的目标官能团的量确定所述第一结合对成员的有效量，并且其中第二结合对成员是样品中的目标被分析物。 10.权利要求9所述的方法，其中在键合到所述一种或多种顺磁粒子上的连接剂上提供所述目标官能团。 11.权利要求9所述的方法，其中所述固定化氨基官能团由氨基硅烷化合物与所述一种或多种顺磁粒子之间的反应提供。 12.权利要求9所述的方法，其中所述选择性化合物包含丙醛。 13.权利要求9、10、11和12中任一项所述的方法，其进一步包括，在步骤(h)之前：如果所述一种或多种顺磁粒子上的测定的目标官能团数小于预定值，制造包含固定化在一种或多种顺磁粒子上的附加目标官能团的附加的一种或多种顺磁粒子。 14.权利要求9、10、11和12中任一项所述的方法，其中所述第一结合对成员的有效量为化学计算量。 15.权利要求14所述的方法，其中所述第一结合对成员是抗原、抗体、酶、底物或多核苷酸。 16.权利要求9、10、11和12中任一项所述的方法，其中使所述目标官能团与一定量的选择性化合物接触包括使所述目标官能团与一定量的选择性化合物反应。