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原文传递一种快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条及其制备方法

专利名称：	一种快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条及其制备方法
摘要：	本发明公开了一种快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条及其制备方法，检测条包括疏水膜、微针、样品垫、结合垫、吸收垫和纤维素膜；疏水膜的一端具有中空区域；微针基底层无针面贴附于疏水膜的下表面，覆盖疏水膜的中空区域；样品垫贴附于从疏水膜中空区域露出的微针的基底层无针面；结合垫贴附于样品垫上表面；结合垫含有胶体金修饰的磺基转移酶单克隆抗体；吸收垫贴附于疏水膜的另一端；纤维素膜的两端分别搭接在结合垫和吸收垫上；纤维素膜上依次设有T线和C线；T线上喷涂固定有T线溶液，T线溶液含有磺基转移酶单克隆抗体；C线上喷涂固定有C线溶液，C线溶液含有二抗。本发明具有简单快速、成本低、专一性强等优点。
专利类型：	发明专利
申请人：	嘉兴智正医药科技有限公司;南京智正医药科技有限公司
发明人：	缪娟;刘阳;吴正国;丁智
专利状态：	有效
申请日期：	2023-07-25T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-14T00:00:00+0800
申请号：	CN202310913985.6
公开号：	CN117054651A
代理机构：	南京钟山专利代理有限公司
代理人：	刘佳慧
分类号：	G01N33/573;G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/573;G01N33/543
申请人地址：	314400 浙江省嘉兴市海宁市海宁经济开发区双联路128号科创中心A座A401室;
主权项：	1.一种快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条，其特征在于：包括疏水膜、微针、样品垫、结合垫、吸收垫和纤维素膜；疏水膜的一端具有上下贯穿的中空区域；微针的针体朝下，基底层无针面贴附于疏水膜的下表面，且覆盖疏水膜的中空区域；微针能够从皮肤中吸取组织液；样品垫、结合垫和吸收垫的材料均为吸水材料；样品垫贴附于从疏水膜中空区域露出的微针的基底层无针面；结合垫贴附于样品垫上表面；结合垫含有胶体金修饰的磺基转移酶单克隆抗体；吸收垫贴附于疏水膜的另一端；纤维素膜的两端分别搭接在结合垫和吸收垫上；沿从结合垫至吸收垫的方向，纤维素膜上依次设有一条T线作为检测线和一条C线作为质控线；T线上喷涂固定有T线溶液，T线溶液含有磺基转移酶单克隆抗体；C线上喷涂固定有C线溶液，C线溶液含有二抗。 2.根据权利要求1所述的快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条，其特征在于：其中，所述胶体金修饰的磺基转移酶单克隆抗体的制备方法为：加热煮沸氯金酸溶液，加入还原剂还原得到胶体金粒径为10～40nm的胶体金溶液；还原剂为柠檬酸三钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠中的一种；调节胶体金溶液的pH至8，加入磺基转移酶单克隆抗体孵育，用BSA和PEG封闭多余的游离胶体金，离心得到所述胶体金修饰的磺基转移酶单克隆抗体；胶体金与磺基转移酶单克隆抗体的质量比为1∶3～100。 3.根据权利要求1所述的快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条，其特征在于：其中，所述结合垫的制备方法为：将结合垫材料浸于30～40℃的结合垫缓冲处理液中20～40min，然后用磷酸盐缓冲液清洗，干燥得到预处理的结合垫材料；结合垫材料为玻璃纤维素膜、聚酯膜、聚偏二氟乙烯膜、尼龙膜、聚丙烯膜中的一种；结合垫缓冲处理液的配制方法为：将特异性吸附杂蛋白的BSA、保护剂蔗糖和防腐剂叠氮钠溶于磷酸盐缓冲液；将胶体金修饰的磺基转移酶单克隆抗体悬重后喷涂在预处理后的结合垫材料上，干燥得到所述结合垫。 4.根据权利要求1所述的快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条，其特征在于：其中，所述样品垫的制备方法为：将样品垫材料浸于30～40℃的样品垫缓冲处理液中20～40min，然后用磷酸盐缓冲液清洗，干燥得到所述样品垫；样品垫材料为玻璃纤维素膜、聚酯膜、聚偏二氟乙烯膜、尼龙膜中的一种；样品垫缓冲处理液的配制方法为：将特异性吸附杂蛋白的BSA和表面活性剂吐温20溶于磷酸盐缓冲液。 5.根据权利要求1所述的快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条，其特征在于：其中，所述纤维素膜中，T线上喷涂的T线溶液中，磺基转移酶单克隆抗体的浓度为0.7～1.3mg/ml； C线上喷涂的C线溶液中的二抗为抗鼠抗体或抗兔抗体。 6.根据权利要求1所述的快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条，其特征在于：其中，所述纤维素膜的制备方法为：将T线溶液喷涂固定于纤维素膜的T线处，C线溶液喷涂固定于纤维素膜的C线处，于30～40℃进行干燥固定，得到所述纤维素膜；纤维素膜为硝酸纤维素膜或羧化纤维素膜。 7.根据权利要求1所述的快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条，其特征在于：其中，所述微针的制备方法为：将交联聚合物材料的引发剂、聚合物材料与水混合搅拌，得到可交联聚合物溶液；将可交联聚合物溶液充分灌注入微针阴模模具中，浓缩干燥，然后进行光固化，得到所述微针；聚合物材料为甲基丙烯酸透明质酸、甲基丙烯酰化壳聚糖、甲基丙烯酰化羧甲基壳聚糖、甲基丙烯酰明胶、甲基丙烯酰化海藻酸钠、甲基丙烯酰化丝素蛋白、聚甲基丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酰化硫酸软骨素、甲基丙烯酰化聚赖氨酸、聚乳酸、聚乙烯醇、聚乙二醇丙烯酸酯、甲壳素、壳聚糖、丝素蛋白、海藻酸钠、丙烯酰胺、聚多巴胺中的一种或多种；引发剂的用量为2～3.5mg/ml，聚合物材料的浓度为4～50wt％；浓缩干燥的温度为35～50℃，湿度为25～40％，时间为1.5～8h；光固化时间为60-120s；微针阴模模具针体长度为50～1500μm，针体底部直径为50～S300μm，针间距为500～1000μm。 8.根据权利要求1所述的快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条，其特征在于：其中，所述疏水膜为聚氯乙烯或聚对苯二甲酸乙二醇酯；所述吸收垫为滤纸纤维。 9.根据权利要求1所述的快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条，其特征在于：其中，所述样品垫边长为8～12mm；样品垫与所述疏水膜的中空区域相匹配；所述结合垫边长4～6mm；吸收垫的宽度为1～1.5cm，长度为4～6mm；所述纤维素膜的长度为1.8～2.2cm，宽度为3～5mm；T线和C线相距3～5mm；纤维素膜与结合垫的重合长度为4mm，纤维素膜与吸收垫的重合长度为1～2mm。 10.如权利要求1-9任意一项所述的快速检测磺基转移酶的胶体金微针检测条的制备方法，其特征在于：裁切所述样品垫、结合垫和吸收垫；将微针和样品垫与疏水膜的中空区域对应并固定，再依次将结合垫、吸收垫和纤维素膜置于相应位置并结合，使得纤维素膜分别压住结合垫4mm、吸收垫1~2mm。
所属类别：	发明专利