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FOXO3基因及其靶向抑制剂在鸡原始生殖细胞增殖及迁移定植中的应用
| 专利名称： | FOXO3基因及其靶向抑制剂在鸡原始生殖细胞增殖及迁移定植中的应用 |
| 摘要： | 本发明公开了FOXO3基因及其靶向抑制剂在鸡原始生殖细胞增殖及迁移定植中的应用，属于生物技术领域。本发明深入研究了靶向下调FOXO3基因表达对鸡原始生殖细胞增殖和体内迁移效率的影响。结果表明，在现有的培养鸡原始生殖细胞培养液基础上添加1μM的FOXO3的抑制剂Carbenoxolone(CBX)可显著促进鸡原始生殖细胞的体外增殖。经验证，干扰FOXO3基因表达也会显著促进鸡原始生殖细胞增殖。另外，经1μM抑制剂CBX处理后的原始生殖细胞，注射入鸡胚体内，迁移定植性腺能力出现了显著升高。本发明能有效地促进体外鸡原始生殖细胞的增殖能力,基础培养液中添加适宜浓度CBX对鸡原始生殖细胞可显著提高迁移定植到性腺的能力，且能很好的维持其生物学特性。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 山东;37 |
| 申请人： | 山东农业大学 |
| 发明人： | 朱桂玉;马玉晓;王恒;王续钊;薛曼;魏佳慧;郭晓彤;孟璐 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2023-07-05T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2023-11-07T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN202310817425.0 |
| 公开号： | CN117007813A |
| 代理机构： | 山东誉丰合创知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 薛鹏喜 |
| 分类号： | G01N33/68;G01N21/64;C12Q1/6888;C12N5/0735;C12N15/113;G;C;G01;C12;G01N;C12Q;C12N;G01N33;G01N21;C12Q1;C12N5;C12N15;G01N33/68;G01N21/64;C12Q1/6888;C12N5/0735;C12N15/113 |
| 申请人地址： | 271018 山东省泰安市岱宗大街61号 |
| 主权项： | 1.FOXO3基因作为靶标在调控鸡原始生殖细胞增殖和迁移定植中的应用。 2.靶向FOXO3基因的抑制剂在如下(1)或(2)中的应用： (1)制备促进鸡原始生殖细胞增殖和/或迁移定植的产品； (2)构建鸡原始生殖细胞增殖且不改变生殖干细胞潜能的体外培养系统。 3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述靶向FOXO3基因的抑制剂选自甘珀酸钠或干扰RNA。 4.一种促进鸡原始生殖细胞增殖和/或迁移定植的方法，其特征在于，包括以下步骤： 将鸡原始生殖细胞用含有甘珀酸钠的基础培养液进行培养； 或者，通过siRNA干扰鸡原始生殖细胞FOXO3基因的表达。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述基础培养液中甘珀酸钠的浓度为0.5μM-2μM。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述基础培养液中甘珀酸钠的浓度为1μM。 7.根据权利要求4-6任一项所述的方法，其特征在于，所述基础培养液为含有25ng/μLAcitivin A、50ng/μL bFGF、0.1mMβ-mercaptoethanol、1.2mM Sodium Pyruvate、1XAntibiotic-antimycotic、1X B27 supplement、1X GS nucleosides、1X GlutaMax、1XNEAA、2.5％(体积分数)鸡血清和7.5％(体积分数)胎牛血清的KO-DMEM培养基。 8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述siRNA的正义链和反义链序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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