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原文传递一种脉血康胶囊抗凝血酶活性的检测方法

专利名称：	一种脉血康胶囊抗凝血酶活性的检测方法
摘要：	本发明提供一种脉血康胶囊抗凝血酶活性的检测方法，所述检测方法包括：(1)将脉血康胶囊内容物浸渍于生理盐水中，离心，得待测样品；(2)取待测样品与纤维蛋白原的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液混合，并震荡均匀，加入一定量凝血酶溶液，保温，于酶标仪下测定吸光度；(3)记录吸光度并绘制折线图，以消耗的凝血酶溶液体积为横坐标，以吸光度值为纵坐标，计算折线图中相邻两点的斜率，记为Kn～n+1，以斜率最大时的n+1点作为凝固终点，利用凝固终点时凝血酶溶液的体积计算脉血康胶囊抗凝血酶活性。本发明采用仪器进行测试，利用吸光度值确定凝固终点，从而计算脉血康胶囊的抗凝血酶活性，具有客观性强、准确性高和重现性好等优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	深圳市药品检验研究院(深圳市医疗器械检测中心)
发明人：	谢天柱;陈宁;吴熙;秦美蓉;孙晓;李俊鹏;王平
专利状态：	有效
申请日期：	2023-08-31T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-14T00:00:00+0800
申请号：	CN202311115133.9
公开号：	CN117054362A
代理机构：	北京品源专利代理有限公司
代理人：	曾菊花
分类号：	G01N21/33;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/33
申请人地址：	518057 广东省深圳市南山区粤海街道高新中二道28号
主权项：	1.一种脉血康胶囊抗凝血酶活性的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括： (1)将脉血康胶囊内容物浸渍于生理盐水中，离心，取上清液作为待测样品； (2)取步骤(1)制得待测样品与纤维蛋白原的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液混合，并震荡均匀，然后每次加入一定量凝血酶溶液，保温，于酶标仪下测定吸光度； (3)记录步骤(2)中吸光度并绘制折线图，以消耗的凝血酶溶液体积为横坐标，以吸光度值为纵坐标，计算折线图中相邻两点的斜率，记为Kn～n+1，以Kn～n+1为最大值时的n+1点作为凝固终点，利用凝固终点时凝血酶溶液的体积计算脉血康胶囊抗凝血酶活性。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述脉血康胶囊内容物与生理盐水的质量体积比为1g:(4.5-5.5)mL。 3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述浸渍的时间为25-35min。 4.根据权利要求1-3任一项所述的检测方法，其特征在于，所述离心的转速为1500-2500rpm，离心的时间为8-12min。 5.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征在于，所述纤维蛋白原的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液中纤维蛋白原的浓度为4.5-5.5mg/mL；优选地，所述纤维蛋白原的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液的pH值为7-8；优选地，所述待测样品与纤维蛋白原的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液的体积比为1:(1.8-2.2)。 6.根据权利要求1-5任一项所述的检测方法，其特征在于，所述凝血酶溶液中凝血酶的浓度为40-45单位/mL。 7.根据权利要求1-6任一项所述的检测方法，其特征在于，所述保温的温度为35-37℃，保温的时间为0.8-1.2min。 8.根据权利要求1-7任一项所述的检测方法，其特征在于，所述酶标仪的测定波长为510-520nm或550-570nm。 9.根据权利要求1-8任一项所述的检测方法，其特征在于，所述计算脉血康胶囊抗凝血酶活性的公式如下：活性(％)＝(C1×V1×W)×100％/(C2×V2×U)；式中： C1为凝血酶溶液的浓度(单位/mL)； C2为样品溶液的浓度(g/mL)； V1为消耗凝血酶溶液的体积(μL)； V2为样品溶液的加入量(μL)； W为平均装量(g)； U为每粒含抗凝血活性单位标示量(单位)。 10.根据权利要求1-9任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括： (1)将脉血康胶囊内容物按照质量体积比为1g:(4.5-5.5)mL浸渍于生理盐水中25-35min，1500-2500rpm离心8-12min，取上清液作为待测样品； (2)取步骤(1)制得待测样品与纤维蛋白原的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液按照体积比为1:(1.8-2.2)混合，并震荡均匀，所述纤维蛋白原的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液中纤维蛋白原的浓度为4.5-5.5mg/mL，pH值为7-8，然后每次加入一定量的浓度为40-45单位/mL的凝血酶溶液，35-37℃保温0.8-1.2min，采用酶标仪于波长为510-520nm或550-570nm下测定吸光度； (3)记录步骤(2)中吸光度并绘制折线图，以消耗的凝血酶溶液体积为横坐标，以吸光度值为纵坐标，计算折线图中相邻两点的斜率，记为Kn～n+1，以Kn～n+1为最大值时的n+1点作为凝固终点，利用凝固终点时凝血酶溶液的体积计算脉血康胶囊抗凝血酶活性，所述计算脉血康胶囊抗凝血酶活性的公式如下：活性(％)＝(C1×V1×W)×100％/(C2×V2×U)；式中： C1为凝血酶溶液的浓度(单位/mL)； C2为样品溶液的浓度(g/mL)； V1为消耗凝血酶溶液的体积(μL)； V2为样品溶液的加入量(μL)； W为平均装量(g)； U为每粒含抗凝血活性单位标示量(单位)。
所属类别：	发明专利