详情

原文传递一种双孢蘑菇多糖的鉴别方法、质量检测系统和方法

专利名称：	一种双孢蘑菇多糖的鉴别方法、质量检测系统和方法
摘要：	本发明属于天然活性物质技术领域，具体涉及一种双孢蘑菇多糖的质量检测系统和方法。本发明旨在建立双孢蘑菇多糖的质量评价体系，采用特征图谱、红外光谱、含量测定方法相结合，全面控制和评价双孢蘑菇多糖的质量，具体包括建立双孢蘑菇多糖分子量分布特征图谱、单糖特征图谱、部分酸水解产物特征图谱、特异酶解产物特征图谱、红外光谱特征图谱以及总多糖、总蛋白质、总糖醛酸含量的检测方法，并采用“中药色谱指纹图谱相似性评价系统”得出对应共有图谱。本发明建立了全面评价和控制双孢蘑菇多糖物质基础的质量评价体系，为双孢蘑菇多糖的开发利用奠定了质量评价基础。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	福建;35
申请人：	漳州片仔癀药业股份有限公司
发明人：	王丽菊;王胜鹏;于娟;王一涛;刘雯;林毅东
专利状态：	有效
申请日期：	2022-05-07T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-14T00:00:00+0800
申请号：	CN202210493618.0
公开号：	CN117054532A
代理机构：	成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	郑勇力;张娟
分类号：	G01N30/02;G01N30/74;G01N30/86;G01N30/06;G01N21/3577;G01N21/31;G;G01;G01N;G01N30;G01N21;G01N30/02;G01N30/74;G01N30/86;G01N30/06;G01N21/3577;G01N21/31
申请人地址：	363099 福建省漳州市芗城区琥珀路1号
主权项：	1.一种双孢蘑菇多糖的质量检测系统，其特征在于：它是采用如下方法对双孢蘑菇多糖进行检测时，合格品的检测结果应当满足如下所述的条件的至少一个或多个的组合： 1)采用苯酚-硫酸法测定双孢蘑菇多糖的总多糖含量，采用Bradford法测定双孢蘑菇多糖中的总蛋白质含量，总多糖含量和总蛋白质含量的比例不得低于2.01； 2)采用间羟基联苯法测定双孢蘑菇多糖中的糖醛酸含量，糖醛酸含量和总多糖含量的比例不低于0.02； 3)采用多角度激光散射与示差折射率检测器相结合的高效尺寸排阻色谱法测定双孢蘑菇多糖的色谱图以及多糖含量，并采用“中药色谱指纹图谱相似性评价系统”得到共有指纹图谱；双孢蘑菇多糖由两个多糖组分构成，组分1的洗脱时间为13.3min至18.2min，组分2的洗脱时间为18.2min至22.0min，组分1的多糖含量应当在5.2％至43.8％范围内，组分2的多糖含量应当在31.6％至56.8％范围内，双孢蘑菇多糖总含量应当在49.2％至82.7％范围内； 4)采用高效液相色谱法结合1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生的方法测定双孢蘑菇多糖的单糖组成、部分酸水解产物特征图谱和酶解产物特征图谱，并采用“中药色谱指纹图谱相似性评价系统”得到彻底酸水解产物、部分酸水解产物以及酶解产物的共有指纹图谱；所述单糖组成应当包括半乳糖、葡萄糖、甘露糖、木糖和葡萄糖醛酸，所述葡萄糖所占比例在50.7％至92.4％之间，所述半乳糖所占比例在6.9％至32.9％之间；所述部分酸水解产物特征图谱应当包括半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖的特征峰，根据特征图谱定量检测，所述葡萄糖所占比例在37.4％至94.8％之间，所述半乳糖所占比例在5.2％至42.6％之间；双孢蘑菇多糖的酶解产物特征图谱对纤维素酶有响应，产物为葡萄糖； 5)采用红外光谱仪测定双孢蘑菇多糖的红外光谱特征，并采用“中药色谱指纹图谱相似性评价系统”得到共有指纹图谱；所述红外光谱应当包括吡喃糖环和α构型的谱峰。 2.按照权利要求1所述的质量检测系统，其特征在于：所述多角度激光散射与示差折射率检测器相结合的高效尺寸排阻色谱法的色谱条件为：色谱柱选择采用ShodexOHpak SB-806M HQ凝胶柱，柱温为30-40℃，样品浓度约为0.5-1.0mg/mL，流动相为0.5-1.0％NaCl水溶液，流速为0.3-0.6mL/min，进样量为80-150μL，蘑菇多糖的dn/dc值为0.13-0.14mL/g。 3.按照权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于：所述高效液相色谱法的色谱条件为：流动相为磷酸盐缓冲液和乙腈的混合液，色谱柱采用C18色谱柱。 4.按照权利要求3所述的质量检测系统，其特征在于：所述高效液相色谱法的色谱条件为：流动相为体积比80：20-90：10的磷酸盐缓冲液和乙腈，所述磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠和磷酸二氢钠配制而成的浓度为0.05-0.15M、pH为6.6-6.8的缓冲液，所述色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相色谱柱，柱温25-35℃，进样量10-30μL，流速0.5-1.2mL/min，波长240-250nm。 5.按照权利要求1所述的质量检测系统，其特征在于：所述双孢蘑菇多糖的单糖组成的测定方法是：用1-3mol/L的三氟乙酸将双孢蘑菇多糖水解后，用高效液相色谱法结合1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生的方法测定。 6.按照权利要求1所述的质量检测系统，其特征在于：所述双孢蘑菇多糖的部分酸水解产物特征图谱的测定方法是：用0.3-0.7mol/L的三氟乙酸将双孢蘑菇多糖水解后，用高效液相色谱法结合1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生的方法测定。 7.按照权利要求1所述的质量检测系统，其特征在于：所述双孢蘑菇多糖的酶解产物特征图谱的测定方法是：用纤维素复合酶将双孢蘑菇多糖水解后，用高效液相色谱法结合1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生的方法测定。 8.一种双孢蘑菇多糖的质量检测方法，其特征在于：它是采用权利要求1-7任一项所述的质量检测系统对双孢蘑菇多糖进行质量检测。
所属类别：	发明专利