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粪便短链脂肪酸作为原发性震颤诊断标志物的应用
| 专利名称： | 粪便短链脂肪酸作为原发性震颤诊断标志物的应用 |
| 摘要： | 本发明提供了粪便短链脂肪酸作为原发性震颤诊断标志物的应用。将原发性震颤和健康人区别的粪便短链脂肪酸为丙酸、丁酸、异丁酸中的任意一种或多种组合；进一步，将原发性震颤和帕金森病区别的粪便短链脂肪酸为异丁酸、异戊酸中的任意一种或两种组合。本发明首次提出通过检测粪便短链脂肪酸发现原发性震颤患者、帕金森病患者与健康人的粪便短链脂肪酸存在差异，筛选出差异粪便短链脂肪酸作为原发性震颤的诊断标志物，可用于与帕金森的鉴别诊断，对早期诊断、早期干预，以及深入了解原发性震颤和帕金森的病理机制等有重要意义。同时本发明以粪便为样本，相较于脑脊液等样本易得、收集方便、数量大，价格相较于神经影像低且检测周期短。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 上海;31 |
| 申请人： | 上海交通大学医学院附属瑞金医院 |
| 发明人： | 陈生弟;黄沛;谭玉燕;张平辰;杜娟娟 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2023-07-14T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2023-11-10T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN202310870181.2 |
| 公开号： | CN117030874A |
| 代理机构： | 上海申浩律师事务所 |
| 代理人： | 赵建敏 |
| 分类号： | G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86 |
| 申请人地址： | 200025 上海市黄浦区瑞金二路197号 |
| 主权项： | 1.检测粪便短链脂肪酸的试剂在制备原发性震颤诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于：所述粪便短链脂肪酸为丙酸、丁酸、异丁酸、异戊酸中的任意一种或多种组合。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：将原发性震颤和健康人区别的所述粪便短链脂肪酸为丙酸、丁酸、异丁酸中的任意一种或多种组合；将原发性震颤和帕金森病区别的所述粪便短链脂肪酸为异丁酸、异戊酸中的任意一种或两种组合。 3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于： 其中，当所述粪便短链脂肪酸为丙酸、丁酸、异丁酸时，单独以丙酸为诊断标志物的截点浓度为675.727μg/g，单独以丁酸为诊断标志物的截点浓度为1502.558μg/g，以异丁酸为诊断标志物的截点浓度为94.236μg/g， 健康人中鉴别原发性震颤的模型如下： Y1＝2.835-0.001*A-0.001*B-0.013*C，Prob1＝eY1/(1+eY1)； 其中，A、B、C分别为粪便样本中根据气相色谱-质谱检测得到的丙酸、丁酸和异丁酸的浓度值；Prob1表示判断为原发性震颤的概率； 当所述粪便短链脂肪酸为异戊酸和异丁酸时，单独以异戊酸为诊断标志物的截点浓度为79.179μg/g，单独以异丁酸为诊断标志物的截点浓度为107.871μg/g， 将原发性震颤和帕金森病进行鉴别诊断的模型如下： Y2＝-2.100-0.042*D+0.067*E，Prob2＝eY2/(1+eY2)； 其中D、E分别为粪便样本中根据气相色谱-质谱检测得到的异戊酸和异丁酸的浓度值，Prob2表示判断为原发性震颤的概率。 4.检测粪便短链脂肪酸的试剂在制备鉴别原发性震颤和帕金森病试剂或试剂盒中的的应用，其特征在于：所述粪便短链脂肪酸为异丁酸、异戊酸中的任意一种或两种组合， 单独以异戊酸为诊断标志物的截点浓度为79.179μg/g，单独以异丁酸为诊断标志物的截点浓度为107.871μg/g， 将原发性震颤和帕金森病进行鉴别诊断的模型如下： Y2＝-2.100-0.042*D+0.067*E，Prob2＝eY2/(1+eY2)； 其中D、E分别为为粪便样本中根据气相色谱-质谱检测得到的异戊酸和异丁酸的浓度值，Prob2表示判断为原发性震颤的概率。 5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于： 其中，检测粪便样本中短链脂肪酸的步骤如下： (1)取一定量粪便样本于离心管中，依次加15％磷酸、125μg/ml的内标异己酸溶液和乙醚匀浆，而后于4℃12000rpm离心10min，取上清液； (2)采用ThermoTrace1310气相色谱-质谱联用仪进行短链脂肪酸检测，提取目标短链脂肪酸和内标异己酸，气相色谱-质谱条件如下： 色谱柱：AgilentHP-INNOWAX毛细管柱；升温程序：初始温度90℃保持1分钟，以10℃/min升到120℃，之后以5℃/min升到150℃，最后以25℃/min升温至250℃维持2min；载气：氦气，流速1.0mL/min；进样口温度250℃，以10:1分流进样，进样体积为1μL； 质谱条件：电子电离源，电子能量70eV；气相色谱质谱接口温度250℃，离子源温度300℃；扫描模式：单离子扫描模式； (3)气相色谱-质谱分析产生的原始数据采用MassHunter软件对每种粪便短链脂肪酸进行峰积分、校正及定量分析，将使用峰面积进行代谢物浓度的计算。 6.一种原发性震颤诊断试剂盒，其特征在于，包括粪便样本处理试剂以及内标试剂，所述粪便样本处理试剂包括15％磷酸和乙醚；所述内标试剂为125μg/ml的异己酸溶液。 7.一种原发性震颤诊断系统，其特征在于，包括： 输入显示模块，用于输入患者的基本信息及粪便样本中丙酸、丁酸、异丁酸、异戊酸的检测浓度，并对诊断结果进行显示； 计算模块，基于预设模型公式1和公式2对罹患原发性震颤的概率进行计算： 模型公式1：Y1＝2.835-0.001*A-0.001*B-0.013*C，Prob1＝eY1/(1+eY1)； 其中，A、B、C分别为粪便样本中根据气相色谱-质谱检测得到的丙酸、丁酸和异丁酸的浓度值；Prob1表示判断为原发性震颤的概率； 模型公式2：Y2＝-2.100-0.042*D+0.067*E，Prob2＝eY2/(1+eY2)； 其中，D、E分别为粪便样本中根据气相色谱-质谱检测得到的异戊酸和异丁酸的浓度值，Prob2表示判断为原发性震颤的概率； 判定模块，基于预设规则对是否罹患原发性震颤进行判定并将结果传输给输入显示模块。 8.根据权利要求7所述的原发性震颤诊断系统，其特征在于，还包括： 存储模块，对原发性震颤诊断系统运行过程中的各项信息进行存储； 控制模块，控制输入显示模块、计算模块以及判定模块正常运行； 所述判定模块基于如下规则进行判断： 当丙酸浓度不高于675.727μg/g、丁酸浓度不高于1502.558μg/g、异丁酸浓度不高于94.236μg/g或Prob1大于0.5时，判定为原发性震颤；进一步当异戊酸浓度不高于79.179μg/g、异丁酸浓度不高于107.871μg/g或Prob2大于0.5时，判定为原发性震颤而非帕金森病。 9.一种气相色谱-质谱联用装置中的内置电子设备，其特征在于，包括数据存储器、数据处理器以及存储在存储器上并可在处理器上运行的原发性震颤诊断系统的计算机程序， 其中，所述数据存储器存储有气相色谱-质谱的检测条件、气相色谱-质谱产生的原始数据以及处理计算后的浓度数值，所述原发性震颤诊断系统如权利要求7～8任一项所述。 10.一种非暂态计算机可读存储介质，其上存储有计算机程序，其特征在于，该计算机程序被处理器执行时实现如权利要求7或8所述的步骤。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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