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原文传递糖基化谱分析方法以描述生物分子功能特征

专利名称：	糖基化谱分析方法以描述生物分子功能特征
摘要：	生物分子的糖基化谱描述了此类生物分子的重要方面。生物分子的糖基化谱的表征是生物分子的制造和分析过程中的关键质量属性的重要部分。本文描述的是确定和表征生物分子的糖基化谱的方法。具体地，该方法使用一个或多个指数来将糖基化谱描述为此类生物分子的指纹。
专利类型：	发明专利
申请人：	阿瑞斯贸易股份公司
发明人：	R·马斯特朗杰利;A·萨特韦卡尔
专利状态：	有效
申请日期：	2022-03-21T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-24T00:00:00+0800
申请号：	CN202280025026.4
公开号：	CN117120848A
代理机构：	隆天知识产权代理有限公司
代理人：	吴小瑛
分类号：	G01N33/68;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68
申请人地址：	瑞士欧博讷
主权项：	1.一种确定生物分子的糖基化身份的方法，包括： a.将生物分子提交给LC-MS分析， b.根据步骤a)中获得的结果，计算选自以下中的至少三个指数的值：唾液酸化指数、唾液酸化程度、NANA 2,6％、NANA 2,3％、NGNA％、O-乙酰基-NANA％、触角指数、位点占用程度、核心岩藻糖基化程度、触角岩藻糖指数、半乳糖基化指数、仅用于含有Fc区的分子的G0、仅用于含有Fc区的分子的G1、仅用于含有Fc区的分子的G2、αGal指数、LAC重复指数、甘露糖指数、杂化指数、双分支指数和中性指数、N-乙酰葡糖胺指数(GlcNac)和核心-xi程度(仅用于O-聚糖)，以及 c.排列步骤b)中获得的计算值，其中排列的值描述了生物分子的糖基化身份。 2.根据权利要求1所述的方法，其中首先从含有所述生物分子的混合物中纯化所述生物分子。 3.根据权利要求1所述的方法，其中所述排列的值是用于描述所述生物分子的糖基化身份的标准化度量。 4.根据权利要求1所述的方法，其中所述排列的值描述所述生物分子的指纹谱。 5.一种确定生物分子与参考生物分子的生物相似性的方法，包括： a.将生物分子提交给LC-MS分析， b.根据步骤a)中获得的结果，计算选自以下中的至少三个指数的值：唾液酸化指数、唾液酸化程度、NANA 2,6％、NANA 2,3％、NGNA％、O-乙酰基-NANA％、触角指数、位点占用程度、核心岩藻糖基化程度、触角岩藻糖指数、半乳糖基化指数、仅用于含有Fc区的分子的G0、仅用于含有Fc区的分子的G1、仅用于含有Fc区的分子的G2、αGal指数、LAC重复指数、甘露糖指数、杂化指数、双分支指数和中性指数、N-乙酰葡糖胺指数(GlcNac)和核心-xi程度(仅用于O-聚糖)，以及 c.确定步骤c)中获得的计算值与参考生物分子的计算值的偏差，其中，如果步骤c)中确定的偏差在预设范围内，则认为生物分子是生物相似的；如果步骤c)中确定的偏差在预设范围之外，则认为生物分子不相似。 6.一种在制备生物分子的工艺中建立可比性的方法，包括： a.根据制备生物分子的工艺制备第一批次的第一生物分子， b.根据制备生物分子的工艺制备第二批次的第二生物分子，其中步骤a)和步骤b)的工艺包括相同的工艺步骤， c.分别从步骤a)和步骤b)中获得的包含第一和第二生物分子的混合物中纯化第一和第二生物分子，以获得经纯化的第一生物分子和经纯化的第二生物分子， d.将经纯化的第一和第二生物分子中的每一个提交给LC-MS分析， e.根据步骤d)中获得的结果，计算选自以下中的至少三个指数的值：唾液酸化指数、唾液酸化程度、NANA 2,6％、NANA 2,3％、NGNA％、O-乙酰基-NANA％、触角指数、位点占用程度、核心岩藻糖基化程度、触角岩藻糖指数、半乳糖基化指数、仅用于含有Fc区的分子的G0、仅用于含有Fc区的分子的G1、仅用于含有Fc区的分子的G2、αGal指数、LAC重复指数、甘露糖指数、杂化指数、双分支指数和中性指数、N-乙酰葡糖胺指数(GlcNac)和核心-xi程度(仅用于O-聚糖)，以及 f.确定第一生物分子和第二生物分子在步骤e)中每个所选指数的计算值之间的偏差，其中，如果步骤f)中确定的偏差在预设范围内，则认为第一生物分子和第二生物分子相同。 7.一种确定在工艺中生物分子与参考生物分子的可比性的方法，包括： a.根据制备生物分子的工艺批量制备生物分子， b.从步骤a)中获得的包含生物分子的混合物中纯化生物分子，以获得经纯化的生物分子， c.将经纯化的生物分子提交给LC-MS分析， d.根据步骤c)中获得的结果，计算选自以下中的至少三个指数的值：唾液酸化指数、唾液酸化程度、NANA 2,6％、NANA 2,3％、NGNA％、O-乙酰基-NANA％、触角指数、位点占用程度、核心岩藻糖基化程度、触角岩藻糖指数、半乳糖基化指数、仅用于含有Fc区的分子的G0、仅用于含有Fc区的分子的G1、仅用于含有Fc区的分子的G2、αGal指数、LAC重复指数、甘露糖指数、杂化指数、双分支指数和中性指数、N-乙酰葡糖胺指数(GlcNac)和核心-xi程度(仅用于O-聚糖)，以及 e.确定步骤d)中每个所选指数的计算值与生物分子的指数的参考值的偏差，其中，如果步骤e)中确定的偏差在预设范围内，则认为生物分子与参考生物分子相同。 8.根据权利要求7所述的方法，当所述生物分子和所述参考生物分子被认为是生物相似物时，所述方法进一步包括对生物分子为样品的批次进行批量释放。 9.根据权利要求7所述的方法，其中所述方法是确定所述生物分子与所述参考生物分子的生物相似性。 10.根据权利要求9所述的方法，其中如果步骤e)中确定的偏差在预设范围之外，则认为所述生物分子在糖基化方面不是生物相似物。 11.一种在生产相同生物分子的不同工艺之间建立可比性的方法，包括： a.根据制备生物分子的第一工艺制备第一生物分子， b.根据制备生物分子的第二工艺制备第二生物分子，其中步骤a)和步骤b)的工艺包括至少一个不同的工艺步骤， c.分别从步骤a)和步骤b)中获得的包含第一和第二生物分子的混合物中纯化第一和第二生物分子，以获得经纯化的第一生物分子和经纯化的第二生物分子， d.将经纯化的第一和第二生物分子中的每一个提交给LC-MS分析， e.根据步骤d)中获得的结果，计算选自以下中的至少三个指数的值：唾液酸化指数、唾液酸化程度、NANA 2,6％、NANA 2,3％、NGNA％、O-乙酰基-NANA％、触角指数、位点占用程度、核心岩藻糖基化程度、触角岩藻糖指数、半乳糖基化指数、仅用于含有Fc区的分子的G0、仅用于含有Fc区的分子的G1、仅用于含有Fc区的分子的G2、αGal指数、LAC重复指数、甘露糖指数、杂化指数、双分支指数和中性指数、N-乙酰葡糖胺指数(GlcNac)和核心-xi程度(仅用于O-聚糖)，以及 f.确定第一生物分子和第二生物分子在步骤e)中每个所选指数的计算值之间的偏差，其中，如果步骤f)中确定的偏差在预设范围内，则认为第一生物分子和第二生物分子相同，并且第一和第二工艺产生了生物相似的生物分子。 12.一种确定生物分子的功能特征的方法，包括： a.根据权利要求1所述的方法确定生物分子的糖基化身份， b.将所选指数所获得的值与此类指数的参考值进行比较，所述参考值单独或其组合与生物分子的功能特征相关，以及 c.确定生物分子的一种或多种功能特征，所述一种或多种功能特征选自免疫原性风险、药物-受体相互作用、mAb效应子功能、结合位点的变构调节、生物利用度、药代动力学、生物分子稳定性和溶解度。 13.根据权利要求12所述的方法，其中当所述生物分子的功能特征是聚糖谱时，所述方法还包括将样品生物分子的聚糖谱与生物分子的参考聚糖谱进行比较，并确定所述生物分子是否来自与参考生物分子相同的来源和/或工艺。 14.根据权利要求13所述的方法，其中如果样品生物分子的聚糖谱与参考聚糖谱之间存在差异，则所述样品生物分子被视为假冒生物分子。
所属类别：	发明专利