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原文传递一种脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法

专利名称：	一种脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法
摘要：	本发明涉及生物医药技术领域，具体公开了一种脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，通过分析细胞数量与磷元素强度之间的线性关系，获得相关的线性方程，然后通过ICP‑AES检测磷元素强度和硼元素强度，然后通过获得的线性方程计算得到细胞数量，然后再通过标准硼溶液线性方程计算细胞中的硼浓度。本发明采用一步法直接将培养贴壁细胞用混合浓硫酸和浓硝酸消化后利用ICP‑AES同时测定细胞内的硼元素强度和磷元素强度，从磷元素强度和细胞数量的线性方程中求出细胞数，然后用标准硼溶液线性方程计算硼浓度，再用硼浓度除以细胞数获得单个细胞中的硼浓度，该方法简单方便，并节省时间和费用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	甘肃;62
申请人：	兰州大学第二医院
发明人：	李玉民;唐富天;顾龙
专利状态：	有效
申请日期：	2023-08-02T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-03T00:00:00+0800
申请号：	CN202310965587.9
公开号：	CN116990286A
代理机构：	西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	崔瑞迎
分类号：	G01N21/73;C12Q1/02;G;C;G01;C12;G01N;C12Q;G01N21;C12Q1;G01N21/73;C12Q1/02
申请人地址：	730030 甘肃省兰州市城关区临夏路萃英门82号
主权项：	1.一种脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，包括如下步骤： S1，分析细胞数量与磷元素强度之间的线性关系，包括：培养脑肿瘤细胞，进行细胞计数；配制不同细胞数的脑肿瘤细胞培养液，分别离心获得脑肿瘤细胞的细胞沉淀，利用浓硝酸和硫酸混合物消化后获得消化液，测定磷元素强度，分析磷元素强度与细胞数量之间的线性相关性，计算获得线性方程； S2，脑肿瘤细胞中加入硼药孵育，洗涤后进行消化，然后测定磷元素强度，再通过线性方程计算细胞数，测定硼元素强度，然后用标准硼溶液线性方程计算硼浓度；然后利用硼浓度除以计算得到的细胞数即获得单个细胞中硼浓度。 2.根据权利要求1所述的脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，S2中，所述消化过程是利用酸混合液对洗涤后的脑肿瘤细胞消化。 3.根据权利要求1所述的脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，S1中，不同细胞数的脑肿瘤细胞培养液配制过程为：细胞用培养基调整为1.00×106/mL细胞数的细胞培养液，然后分别吸取0.05×106mL、0.10×106mL、0.20×106mL、0.40×106mL、0.60×106mL、0.80×106mL、1.00×106mL、1.20×106mL、1.40×106mL和1.60×106mL的细胞培养液。 4.根据权利要求3所述的脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，S1中，离心条件为600-800g/min离心10-16min。 5.根据权利要求4所述的脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，S1中，所述酸混合液是由浓硝酸和硫酸按照体积比1：1混合而得。 6.根据权利要求5所述的脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，所述脑肿瘤细胞为U87细胞和U251细胞中的任意一种。 7.根据权利要求6所述的脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，所述U87细胞磷元素强度与细胞数量之间的线性相关性的计算线性方程为：y＝72370x+1708，R2＝0.9995； y表示磷元素强度，x表示细胞数量，R2表示相关系数。 8.根据权利要求6所述的脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，所述U251细胞磷强度与细胞数量之间的线性相关性的计算线性方程为：y＝77250x+1846，R2＝0.9994； y表示磷元素强度，x表示细胞数量，R2表示相关系数。 9.根据权利要求1所述的脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，S2中，标准硼溶液线性方程为：y＝162500x+651.3，R2＝0.9996； y表示硼元素强度，x表示硼浓度，R2表示相关系数。 10.根据权利要求1所述的脑肿瘤细胞摄取硼药研究中细胞中硼浓度的测定方法，其特征在于，S2中，所述硼药为硼基苯丙氨酸。
所属类别：	发明专利