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原文传递一种利用流式细胞仪检测tPSA与fPSA的试剂盒

专利名称：	一种利用流式细胞仪检测tPSA与fPSA的试剂盒
摘要：	本发明公开了一种同时检测总前列腺特异性抗原及游离前列腺特异性抗原的方法，包括：将样本/校准品加入标记抗总前列腺特异性抗原的单克隆抗体A包被的固相载体溶液中，混匀，震荡孵育，经抗原抗体特异性亲和，微球对样本内tPSA吸附，清洗后加入荧光素一标记tPSA抗体B和荧光素二标记的fPSA抗体C的混合液，混匀孵育，荧光抗体B特异性结合荧光微球上tPSA，荧光单克隆抗体C只与fPSA表位特异性结合；流式细胞仪检测得tPSA和fPSA浓度，计算fPSA/tPSA比值，一次检测获得三个指标。该方法同时检测总前列腺抗原和游离前列腺抗原，实验步骤简单，检测时间短，抗体用量少，降低检测成本，且灵敏度高、准确度高。
专利类型：	发明专利
申请人：	中拓生物有限公司;中金进出口有限公司;中科梅奥(山东)医学检验有限公司;中拓医学检验有限公司
发明人：	徐玉超;张强;隗勇
专利状态：	有效
申请日期：	2023-08-16T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-17T00:00:00+0800
申请号：	CN202311032099.9
公开号：	CN117074678A
代理机构：	济南泉城专利商标事务所
代理人：	王翠翠
分类号：	G01N33/574;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/543;G01N15/14;G;G01;G01N;G01N33;G01N15;G01N33/574;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/543;G01N15/14
申请人地址：	276000 山东省临沂市高新技术开发区创新大厦A座;;;
主权项：	1.一种同时检测总前列腺特异性抗原及游离前列腺特异性抗原的方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步：将样本/校准品加入标记前列腺特异性抗原单克隆抗体A(第一抗体)包被固相载体，震荡混匀恒温孵育，样本抗原tPSA(PSA-ACT与fPSA)与其抗体特异性亲和吸附；第二步：加入荧光标记抗体B(第二抗体)和荧光标记单克隆抗体C(第三抗体)的混合液，混匀并孵育，抗体B特异性结合固相载体上的PSA-ACT与fPSA，抗体C与fPSA表位特异性结合；第三步：流式细胞仪检测第二步反应后结果，获取不同荧光通道读取荧光信号MFI(平均荧光强度)，得到tPSA和fPSA浓度。 2.根据权利要求1所述的一种同时检测总前列腺特异性抗原及游离前列腺特异性抗原的方法，其特征在于，所述的固体载体为聚苯乙烯微球、磁力微球或荧光磁性微球，载体表面有可以与抗体氨基结合的活性基团如羧基、环氧基、甲苯磺酰基、醛基，微球尺寸为5-7μm，每100万微球可交联抗体5-10ug。 3.根据权利要求1所述的一种同时检测总前列腺特异性抗原及游离前列腺特异性抗原的方法，其特征在于，荧光素采用不同激发光，采用488或638激发光激发的荧光染料、荧光蛋白或串联染料。 4.根据权利要求3所述的一种同时检测总前列腺特异性抗原及游离前列腺特异性抗原的方法，其特征在于，荧光素为荧光染料FITC、Cy5或荧光蛋白PE、APC。 5.根据权利要求1所述的一种同时检测总前列腺特异性抗原及游离前列腺特异性抗原的方法，其特征在于，第一步与第二步孵育均为37℃恒温避光震荡孵育30min。 6.一种同时检测总前列腺特异性抗原及游离前列腺特异性抗原的试剂盒，其特征在于，包括：包被PSA单克隆抗体A的微球溶液、荧光素一标记tPSA抗体B和荧光素二标记的fPSA抗体C的检测混合液、PSA校准品。
所属类别：	发明专利