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原文传递一种游离性间皮素检测试剂盒

专利名称：	一种游离性间皮素检测试剂盒
摘要：	本发明提供了检测游离性间皮素的间皮素结合分子，所述间皮素结合分子包含间皮素单域抗体和兔IgG Fc段，所述间皮素单域抗体靶向间皮素I区或II区。本发明还提供了一种游离性间皮素检测试剂盒，所述试剂盒包括第一结合分子和第二结合分子，所述第一结合分子和第二结合分子分别包含靶向间皮素Ⅰ区和II区间皮素单域抗体，或者分别包含靶向间皮素II区和I区的间皮素单域抗体，所述试剂盒采用夹心ELISA法。本发明使用的单域抗体能显著提高人血浆中可溶性间皮素检测灵敏度，游离性间皮素检测试剂盒，检测特异性强，灵敏度高，稳定性好。
专利类型：	发明专利
申请人：	上海细胞治疗集团药物技术有限公司;上海细胞治疗集团有限公司
发明人：	陈泰颖;荣丽洁;田圣亚;喻胡容;孙艳;钱其军
专利状态：	有效
申请日期：	2023-09-15T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-07T00:00:00+0800
申请号：	CN202311194826.1
公开号：	CN117007820A
代理机构：	上海专利商标事务所有限公司
代理人：	陶启长;韦东
分类号：	G01N33/68;G01N33/574;C07K16/28;C07K16/30;G;C;G01;C07;G01N;C07K;G01N33;C07K16;G01N33/68;G01N33/574;C07K16/28;C07K16/30
申请人地址：	201805 上海市嘉定区安亭镇园国路1585号8幢201室;
主权项：	1.一种用于游离性间皮素检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含间皮素结合分子，所述间皮素结合分子包含间皮素单域抗体，所述单域抗体的互补决定区CDR包含CDR1、CDR2和CDR3，其中， CDR1的序列选自SEQ ID NO:1-6中的任一种； CDR2的序列选自SEQ ID NO:7-13中的任一种； CDR3的序列选自SEQ ID NO:14-19中的任一种。 2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述CDR1、CDR2、CDR3选自如下任一种组合， CDR1的序列如SEQ ID NO:1所示，CDR2的序列如SEQ ID NO:7所示，CDR3的序列如SEQID NO:14所示；或， CDR1的序列如SEQ ID NO:2所示，CDR2的序列如SEQ ID NO:8所示，CDR3的序列如SEQID NO:15所示；或， CDR1的序列如SEQ ID NO:3所示，CDR2的序列如SEQ ID NO:9所示，CDR3的序列如SEQID NO:16所示；或， CDR1的序列如SEQ ID NO:4所示，CDR2的序列如SEQ ID NO:10所示，CDR3的序列如SEQID NO:17所示；或， CDR1的序列如SEQ ID NO:5所示，CDR2的序列如SEQ ID NO:11所示，CDR3的序列如SEQID NO:18所示；或， CDR1的序列如SEQ ID NO:6所示，CDR2的序列如SEQ ID NO:12所示，CDR3的序列如SEQID NO:19所示；或， CDR1的序列如SEQ ID NO:6所示，CDR2的序列如SEQ ID NO:13所示，CDR3的序列如SEQID NO:19所示。 3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述单域抗体还含有四个骨架区(FR)，分别为FR1、FR2、FR3、FR4，其中， FR1的序列选自SEQ ID NO:20-26中的任一种； FR2的序列选自SEQ ID NO:27-33中的任一种； FR3的序列选自SEQ ID NO:34-40中的任一种； FR4的序列选自SEQ ID NO:41-45中的任一种。 4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述FR1、FR2、FR3、FR4选自如下任一种组合， FR1的序列如SEQ ID NO:20所示，FR2的序列如SEQ ID NO:27所示，FR3的序列如SEQ IDNO:34所示，FR4的序列如SEQ ID NO:41所示；或， FR1的序列如SEQ ID NO:21所示，FR2的序列如SEQ ID NO:27所示，FR3的序列如SEQ IDNO:34所示，FR4的序列如SEQ ID NO:41所示；或， FR1的序列如SEQ ID NO:22所示，FR2的序列如SEQ ID NO:28所示，FR3的序列如SEQ IDNO:35所示，FR4的序列如SEQ ID NO:42所示；或， FR1的序列如SEQ ID NO:23所示，FR2的序列如SEQ ID NO:29所示，FR3的序列如SEQ IDNO:36所示，FR4的序列如SEQ ID NO:41所示；或， FR1的序列如SEQ ID NO:24所示，FR2的序列如SEQ ID NO:30所示，FR3的序列如SEQ IDNO:37所示，FR4的序列如SEQ ID NO:41所示；或， FR1的序列如SEQ ID NO:25所示，FR2的序列如SEQ ID NO:31所示，FR3的序列如SEQ IDNO:38所示，FR4的序列如SEQ ID NO:43所示；或， FR1的序列如SEQ ID NO:26所示，FR2的序列如SEQ ID NO:32所示，FR3的序列如SEQ IDNO:39所示，FR4的序列如SEQ ID NO:44所示；或， FR1的序列如SEQ ID NO:25所示，FR2的序列如SEQ ID NO:33所示，FR3的序列如SEQ IDNO:40所示，FR4的序列如SEQ ID NO:45所示。 5.如权利要求1-4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述单域抗体的序列选自SEQ IDNO:46-53中的任一种。 6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述间皮素结合分子成对使用，分为靶向间皮素I区和II区的结合分子，所述靶向间皮素I区的结合分子包含如SEQ ID NO：46-49任一所示的间皮素单域抗体，所述靶向间皮素II区的结合分子包含如SEQ ID NO：50-53任一所示的间皮素单域抗体；优选地，所述靶向间皮素I区的结合分子包含如SEQ ID NO：46-49任一项所示的间皮素单域抗体，所述靶向间皮素II区的结合分子包含如SEQ ID NO：51或53所示的间皮素单域抗体；更优选地，所述第一结合分子和第二结合分子分别包含如下任一组氨基酸序列的间皮素单域抗体：SEQ ID NO：46和53，SEQ ID NO：47和51，SEQ ID NO：48和51，SEQ ID NO：49和53。 7.如权利要求1-6任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述间皮素结合分子还包括兔IgG Fc段；优选地，所述兔IgG Fc段的氨基酸序列如SEQ ID NO：54所示。 8.如权利要求1-7任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒采用夹心ELISA法。 9.一种游离性间皮素检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括第一结合分子和第二结合分子，所述试剂盒以“支持物-第一结合分子-待检测物-第二结合分子-标记物”形式完成检测；所述第一结合分子和第二结合分子分别包含靶向间皮素Ⅰ区和II区间皮素单域抗体，或者分别包含靶向间皮素II区和I区的间皮素单域抗体。 10.如权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述靶向间皮素Ⅰ区的间皮素单域抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO：46-49任一所示；所述靶向间皮素II区的间皮素单域抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO：50-53任一所示；优选地，所述靶向间皮素I区的结合分子包含如SEQ ID NO：46-49任一项所示的间皮素单域抗体，所述靶向间皮素II区的结合分子包含如SEQ ID NO：51或53所示的间皮素单域抗体；更优选地，所述第一结合分子和第二结合分子分别包含如下任一组氨基酸序列的间皮素单域抗体：SEQ ID NO：46和53，SEQ ID NO：47和51，SEQ ID NO：48和51，SEQ ID NO：49和53。 11.如权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述标记物选自荧光物质、量子点、地高辛标记探针、生物素、放射性同位素、放射性造影剂、顺磁离子荧光微球、电子致密物质、化学发光标记物、超声造影剂、光敏剂或酶中的任一种；优选地，所述标记物为生物素。 12.如权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述第一结合分子的摩尔数多于所述第二结合分子的摩尔比；优选地，所述第一结合分子的摩尔数与所述第二结合分子的摩尔比为5:1-4，更优选为5:2-3。 13.如权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括包被有第一结合分子的反应板、生物素标记的第二结合分子、亲和素标记的催化酶以及底物。 14.如权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括间皮素标准品、样品稀释液、洗涤液和终止液中的任一种或多种。
所属类别：	发明专利