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原文传递一种夏枯草的提取工艺

专利名称：	一种夏枯草的提取工艺
摘要：	本发明公开一种夏枯草的提取工艺，其特征在于，以提取液中芦丁和迷迭香酸的总提取率为考察指标，采用L9（34）正交试验表，以乙醇体积分数（A）、乙醇用量（B）、提取时间（C）、提取次数（D）作为考察因素，优化夏枯草的提取工艺；采用高效液相色谱法同时测定芦丁和迷迭香酸的含量。以迷迭香酸、芦丁的总提取率为考察指标，通过正交试验设计法优选夏枯草的最佳提取工艺，有效提取夏枯草中抗人乳腺癌细胞的效应成分；采用高效液相色谱法同时测定夏枯草中芦丁、迷迭香酸的含量，既保证迷迭香酸能被洗脱出来且分离度良好，又保证芦丁能与相邻杂质分开，简便、快速、准确、重复性好，可供有效控制夏枯草的质量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	南方医科大学第七附属医院(佛山市南海区第三人民医院)
发明人：	吴勇辉
专利状态：	有效
申请日期：	2022-05-18T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-28T00:00:00+0800
申请号：	CN202210559267.9
公开号：	CN117129606A
代理机构：	佛山东平知识产权事务所(普通合伙)
代理人：	黄淑贞
分类号：	G01N30/06;G01N30/12;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/86;A61K36/536;A61P35/00;G;A;G01;A61;G01N;A61K;A61P;G01N30;A61K36;A61P35;G01N30/06;G01N30/12;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/86;A61K36/536;A61P35/00
申请人地址：	528200 广东省佛山市南海区里水镇里官路得胜路段28号
主权项：	1.一种夏枯草的提取工艺，其特征在于，以提取液中芦丁和迷迭香酸的总提取率为考察指标，采用L9（34）正交试验表，以乙醇体积分数（A）、乙醇用量（B）、提取时间（C）、提取次数（D）作为考察因素，优化夏枯草的提取工艺；对于芦丁和迷迭香酸的含量的测定方法包括以下步骤：步骤S1：称取芦丁对照品和迷迭香酸对照品后加甲醇超声溶解，配制成每1mL含20μg芦丁、100μg迷迭香酸的混合对照品溶液；步骤S2：取夏枯草合并提取液，过滤，滤液采用旋转蒸发仪在50℃下减压回收乙醇并浓缩得到浸膏，称重，取10mg样品加甲醇定容到5ml，超声溶解，过滤，制得供试品溶液；步骤S3：利用Cosmosil C18柱（4.6×250mm，5μm）色谱柱制作色谱图，色谱条件为流动相：乙腈（A1）-0.1%磷酸溶液（B1），梯度洗脱（0~10min，25%~40%A1；10~30min，40%~48%A1；30~35min，48%~60%A1；35~40min，60%~60%A1）；检测波长：340nm；流速：1.0mL·mL-1；柱温：室温；进样量：20μL；步骤S4：分别吸取混合对照品溶液适量，加甲醇稀释成芦丁浓度为20、15、10、5、2.5μg·mL-1，迷迭香酸浓度为100、75、50、25、12.5μg·mL-1的系列混合对照品溶液，按步骤S3所述的色谱条件注入液相色谱仪，记录色谱图，以浓度（X）为横坐标，以峰面积（Y）为纵坐标，进行线性回归，得到芦丁、迷迭香酸的回归方程；步骤S5：按照步骤S3所述的色谱条件进样所述供试品溶液测定芦丁、迷迭香酸的峰面积，代入所述线性回归方程，计算芦丁、迷迭香酸的含量。 2.根据权利要求1所述的一种夏枯草的提取工艺，其特征在于，正交试验结果显示对实验结果影响主次为A>D>B>C，即乙醇浓度>提取次数>乙醇体积>提取时间，夏枯草的提取工艺为加12倍量的60%乙醇，提取3次，每次1.0h。 3.根据权利要求1所述的一种夏枯草的提取工艺，其特征在于，所述芦丁或所述迷迭香酸的提取率=（提取量/实验中最高提取量）×100%，所述芦丁和迷迭香酸的总提取率=（迷迭香酸提取率+芦丁提取率）/2。 4.根据权利要求1所述的一种夏枯草的提取工艺，其特征在于，所述芦丁的回归方程为Y芦=66365X-11891，r2=0.9994；、所述迷迭香酸的回归方程为Y迷=70931X-70915，r2=0.9996。 5.根据权利要求1所述的一种夏枯草的提取工艺，其特征在于，按照步骤S3所述的色谱条件得到的芦丁色谱峰、迷迭香酸色谱峰与相邻色谱峰的分离度均＞1.5。 6.根据权利要求1所述的一种夏枯草的提取工艺，其特征在于，按照步骤S3所述的色谱条件重复进样６次所述混合对照品溶液，计算芦丁、迷迭香酸峰面积的RSD值，以测试高效液相色谱仪的精密度。 7.根据权利要求1所述的一种夏枯草的提取工艺，其特征在于，按照步骤S3所述的色谱条件重复进样６次所述供试品溶液，计算芦丁、迷迭香酸含量的RSD值，以验证方法的重复性。
所属类别：	发明专利