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原文传递一种高折射率水溶性折射率匹配试剂以及光透明化方法

专利名称：	一种高折射率水溶性折射率匹配试剂以及光透明化方法
摘要：	本发明属于生物医学光学成像技术领域，更具体地，涉及一种高折射率水溶性折射率匹配试剂以及光透明化方法。本发明提供的一种高折射率水溶性折射率匹配试剂，包括芳香胺类物质、硫脲类物质、第一醇类物质以及水；该折射率匹配试剂中含有10wt％‑40wt％的芳香胺类物质，10wt％‑40wt％的硫脲类物质以及5％‑30wt％的第一醇类物质。基于该水溶性折射率匹配试剂，本发明同时提出的一种高效光透明方法，不仅可以快速、高质量透明小鼠组织器官，也可以高效透明高等哺乳类动物组织，如猪脑块。经其透明的样本无论是在透明度还是成像质量方面相比现有的水溶性方法具有明显的优势。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	华中科技大学
发明人：	朱䒟;朱京谭;俞婷婷
专利状态：	有效
申请日期：	2022-05-10T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-17T00:00:00+0800
申请号：	CN202210665401.3
公开号：	CN117074147A
代理机构：	武汉华之喻知识产权代理有限公司
代理人：	彭翠;张彩锦
分类号：	G01N1/30;G;G01;G01N;G01N1;G01N1/30
申请人地址：	430074 湖北省武汉市洪山区珞喻路1037号
主权项：	1.一种高折射率水溶性折射率匹配试剂，其特征在于，包括芳香胺类物质、硫脲类物质、第一醇类物质以及水；所述芳香胺类物质易溶于水，且其折射率大于或等于1.54；所述硫脲类物质易溶于水，且其折射率大于1.54；该折射率匹配试剂中含有10wt％-40wt％的芳香胺类物质，10wt％-40wt％的硫脲类物质以及5wt％-20wt％的第一醇类物质。 2.如权利要求1所述的折射率匹配试剂，其特征在于，包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂和所述第二试剂均包括所述芳香胺类物质、所述硫脲类物质、所述第一醇类物质以及水；且所述第一试剂中硫脲类物质的浓度小于所述第二试剂中硫脲类物质的浓度；所述第一试剂中第一醇类物质的浓度小于所述第二试剂中第一醇类物质的浓度。 3.如权利要求2所述的折射率匹配试剂，其特征在于，所述第一试剂中含有10wt％-20wt％的芳香胺类物质，10wt％-20wt％的硫脲类物质以及5％-10wt％的第一醇类物质；所述第二试剂中含有25wt％-30wt％的芳香胺类物质，20wt％-40wt％的硫脲类物质以及10wt％-20wt％的第一醇类物质。 4.如权利要求1所述的折射率匹配试剂，其特征在于，所述芳香胺类物质为联苯胺和/或间苯二甲胺；所述硫脲类物质为硫脲、N-甲基硫脲、N，N′-二甲基硫脲和二甲基硫代甲酰胺中的一种或多种；所述第一醇类物质为山梨醇、N-叔丁基二乙醇胺和碘海醇中的一种或多种。 5.利用如权利要求1至4任一项所述的折射率匹配试剂进行的光透明化方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)将固定后的组织浸泡于脱脂液中，使组织充分去脂，得到去脂处理后的组织； (2)对所述去脂处理后的组织进行清洗，洗去残留的脱脂液，得到清洗处理后的组织； (3)将所述清洗后的组织浸泡于如权利要求1至4任一项所述的折射率匹配试剂中，对组织进行透明化处理，得到透明化处理后的组织。 6.如权利要求5所述的光透明化方法，其特征在于，步骤(1)所述脱脂液包括10wt％-25wt％的第二醇类物质，0-10wt％的表面活性剂和水。 7.如权利要求6所述的光透明化方法，其特征在于，所述第二醇类物质为己二醇、N-丁基二乙醇胺和N-叔丁基二乙醇胺中的一种或多种；所述表面活性剂为Triton X-100和/或十二烷基硫酸钠。 8.如权利要求6所述的光透明化方法，其特征在于，步骤(1)将固定后的组织浸泡于脱脂液中12-144h，使组织充分去脂；步骤(2)对所述去脂处理后的组织采用磷酸盐缓冲液进行清洗，清洗时间为12-24h；步骤(3)将所述清洗后的组织浸泡于如权利要求1至4任一项所述的折射率匹配试剂中6-144小时，对组织进行透明化处理，得到透明化处理后的组织。 9.如权利要求6所述的光透明化方法，其特征在于，步骤(3)包括如下子步骤： (3-1)将所述清洗后的组织浸泡于所述第一试剂中，对组织进行初步透明化处理，得到初步透明化处理的组织； (3-2)将所述初步透明化处理的组织浸泡于第二试剂中，直至组织变得完全透明。 10.如权利要求9所述的光透明化方法，其特征在于，步骤(3-1)将所述清洗后的组织浸泡于所述第一试剂中6-72h，对组织进行初步透明化处理；步骤(3-2)将所述初步透明化处理的组织浸泡于第二试剂中6-72h，直至组织变得完全透明。
所属类别：	发明专利