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利用荧光光谱拟合定量测量荧光共振能量转移效率的方法
| 专利名称： | 利用荧光光谱拟合定量测量荧光共振能量转移效率的方法 |
| 摘要： | 本发明涉及荧光共振能量转移效率的测量方法，具体提供了一种利用荧光 光谱拟合定量测量荧光共振能量转移效率的方法。该方法的步骤包括首先测量 得到细胞内供体-受体对的荧光发射谱；进而利用归一化的供体、受体的荧光发 射谱，得到供体-受体对的拟合荧光光谱；最后计算实验光谱与拟合光谱在最接 近时的荧光共振能量转移效率。通过本发明的方法可以有效解决由于光谱激发 串扰和发射串扰而导致很难定量测量FRET效率的问题，从而可以更准确地监 测蛋白的激活程度以及活细胞中蛋白质之间的相互作用。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 申请人： | 华南师范大学 |
| 发明人： | 陈同生;王龙祥 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2009-05-14T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN200910039471.2 |
| 公开号： | CN101551332 |
| 代理机构： | 广州市华学知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 裘 晖;杨晓松 |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01)I |
| 申请人地址： | 510631广东省广州市天河区中山大道西55号 |
| 主权项： | 1、一种利用荧光光谱拟合定量测量荧光共振能量转移效率的方法，包括以 下具体步骤： (1)测量活细胞在供体-受体对转染前后的荧光发射光谱，得到纯的供体 -受体对的荧光发射光谱SPmeasure(λ)； 测量荧光发射光谱时的激发波长438±20nm，发射光谱在470-580nm范 围扫描； (2)分别测量供体和受体的荧光发射光谱，并归一化得到受体标准发射光 谱SPa(λ)和供体标准发射光谱SPd(λ)，利用以下公式得到理论发射光谱 SPnorm(λ)： SPnorm(λ)＝SPnew(λ)/max(SPnew(λ))， 其中， SPnew(λ)＝xφASPa(λ)+(1-x)φD[(1-E)*b*SPd(λ)+EφA*SPa(λ)/φD]， 其中， E是能量共振转移效率，x为激发串扰，φD是供体的量子产额，φA是受体 的量子产额， |
| 所属类别： | 发明专利 |
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