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原文传递 基于光漂白的荧光共振能量效率的定量测量方法
专利名称: 基于光漂白的荧光共振能量效率的定量测量方法
摘要: 本发明涉及荧光共振能量转移效率的测量方法,具体涉及一种基于光漂白 的荧光共振能量效率的定量测量方法。本方法是通过激光共聚焦显微镜采集转 染了供体-受体对的活细胞中受体光漂白前后供体通道和受体通道光漂白前后 的平均荧光强度,来计算荧光共振能量效率。本方法可以有效解决传统的受体 光漂白方法由于光漂白时间过长而导致对活细胞损伤较大的问题。运用本方法, 通过漂白一小部分受体即可定量获FRET效率,从而定量监测活细胞中蛋白质之 间的相互作用。由于本方法漂白时间短,仅为秒量级,可以极大的减少对活细 胞的损伤。
专利类型: 发明专利
申请人: 华南师范大学
发明人: 陈同生;王龙祥
专利状态: 有效
申请日期: 2009-05-14T00:00:00+0800
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN200910039454.9
公开号: CN101581669
代理机构: 广州市华学知识产权代理有限公司
代理人: 裘 晖;杨晓松
分类号: G01N21/64(2006.01)I
申请人地址: 510631广东省广州市天河区中山大道西55号
主权项: 1、一种基于光漂白的荧光共振能量效率的定量测量方法,包括以下具体步 骤: (1)在活细胞中表达供体-受体对; (2)利用激光共聚焦扫描荧光显微镜对上述细胞进行多通道荧光成像和 FRET受体光漂白;FRET检测时,使用氩离子激光器选择性的激光供体,选择合 适的荧光探测通道分别用来收集供体和受体的荧光;光漂白时,采用氩离子激 光器选择性地光漂白受体,采集受体光漂白前后供体通道和受体通道光漂白前 后的平均荧光强度,得到供体通道增加的荧光强度为ΔID以及受体通道减少的荧 光强度为ΔIA; (3)计算荧光共振能量转移效率E:
所属类别: 发明专利
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