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一种快速检测海洋生物体内综合毒性的方法
| 专利名称： | 一种快速检测海洋生物体内综合毒性的方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种快速检测海洋生物体内综合毒性的方法，该方法通过发光细菌的培养、 生物样本的制备、发光细菌相对发光度的测定检测海洋生物体内综合毒性，发光细菌采用海 水发光细菌—明亮发光杆菌T3变种(Photobacterium phosphoreum)，将海洋生物样本的上清 液与发光细菌的菌液混合，通过测定发光细菌的相对发光度，判定所测样品的综合毒性，给 出毒性级别，本发明简单、省时，能够快速检测海洋生物体内的综合毒性。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 辽宁;21 |
| 申请人： | 国家海洋环境监测中心 |
| 发明人： | 刘长安;张世宇;王 慧 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2009-03-06T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN200910010614.7 |
| 公开号： | CN101551381 |
| 代理机构： | 大连八方知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 高 杰 |
| 分类号： | G01N33/48(2006.01)I |
| 申请人地址： | 116622辽宁省大连市凌河街42号 |
| 主权项： | 1、一种快速检测海洋生物体内综合毒性的方法，其特征在于，该方法步骤如下： 一、发光细菌的培养： 采用明亮发光杆菌T3变种(Photobacterium phosphoreum)制备发光细菌新鲜菌悬液： (1)斜面菌种培养：在新鲜斜面上接出第一代斜面，25℃±0.5℃培养24h后立即转接第 二代斜面，25℃±0.5℃培养24h后再转接第三代斜面，25℃±0.5℃培养24h后备用； (2)摇瓶菌液培养：取第三代斜面菌种近一环，接种于装有30ml培养液的100ml烧瓶 中，25℃±0.5℃，160r/min下培养24h备用； (3)将培养后的发光细菌新鲜菌悬液稀释至每毫升108个～109个细胞，初始发光度不低 于800mV，备用； 斜面和菌液的营养基为： 胰蛋白胨 0.5g NaCl 3g Na2HPO4 0.5g KH2PO4 0.5g 酵母 0.5g 甘油 0.3g 蒸馏水 100ml 固体培养基加琼脂 1.69g 二、生物样本的制备： 取生物样品10g，放入搅碎机打碎，加入50ml(V/V)0.1％的含二甲亚砜的人工海水， 振荡30min，6000r离心6min，取上清液进行测试； 三、发光细菌相对发光度的测定： 测定时的室温要控制在20～25℃，同一批样品在测定过程中要求温度波动不超过±1℃； 取若干试管，部分作为对照管的试管中每支加1.98ml的人工海水，作为样品管的试管中每支 加入步骤二制备的生物样本上清液1.98ml，向每支试管中加入步骤一制备的备用的发光细菌 菌液0.02ml，放入发光光度计中检测。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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