专利名称: | 基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法 |
摘要: | 一种纳米材料领域的基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法,包括如下 步骤:(1)首先将量子点分散在硼酸盐缓冲溶液中,然后加入硫化二亚胺和二抗, 混合,反应,离心,洗涤,得到量子点标记的二抗复合物;其中,量子点:硫化 二亚胺:二抗摩尔比为60∶15∶1;或者(2)首先将量子点分散在含有体积分数 为1.25%的戊二醛的磷酸缓冲溶液中,分散,反应,加入二抗,反应,离心,洗 涤,得到量子点标记的二抗复合物;其中,量子点∶戊二醛∶二抗摩尔比为60∶ 15∶1;之后按照标准免疫组化检测方法进行免疫反应和观察。本发明的方法用 荧光显微镜直接进行观察判断,简单易行,荧光光稳定性增加,分析的准确度和 检测的灵敏度有所提高。 |
专利类型: | 发明专利 |
国家地区组织代码: | 上海;31 |
申请人: | 上海交通大学 |
发明人: | 贺 蓉;崔大祥;高 峰;徐 昕 |
专利状态: | 有效 |
申请日期: | 2009-05-07T00:00:00+0800 |
发布日期: | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
申请号: | CN200910050748.1 |
公开号: | CN101551387 |
代理机构: | 上海交达专利事务所 |
代理人: | 王锡麟;王桂忠 |
分类号: | G01N33/536(2006.01)I |
申请人地址: | 200240上海市闵行区东川路800号 |
主权项: | 1、一种基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法,其特征在于,包括如 下步骤: 步骤一,将表面带有羧基或氨基的水溶性量子点与二抗连接, (1)如果是表面带有羧基的水溶性量子点,则首先将量子点分散在硼酸盐 缓冲溶液中,然后加入硫化二亚胺和二抗,混合,25℃下反应3小时,离心,洗 涤,得到量子点标记的二抗复合物; 其中,量子点∶硫化二亚胺∶二抗的摩尔比为60∶15∶1; (2)如果是表面带有氨基的水溶性量子点,则首先将量子点分散在含有体 积分数为1.25%的戊二醛的磷酸缓冲溶液中,超声使之完全分散,25℃下摇床活 化反应3小时,加入二抗,在4℃下反应24小时,离心,洗涤,得到量子点标记的 二抗复合物; 其中,量子点∶戊二醛∶二抗的摩尔比为60∶15∶1; 步骤二,将切片标本先放入二甲苯中脱腊2次,然后置入无水乙醇中梯度水 化,水洗,过氧化氢灭活内源性过氧化氢酶,微波抗原修复,水洗后用正常山羊 非免疫血清封闭,滴加一抗,4℃反应过夜,磷酸缓冲溶液洗后加入量子点标记 的二抗复合物,避光条件下37℃反应30~60分钟,磷酸缓冲溶液漂洗,甘油封片; 磷酸缓冲溶液代替一抗作为阴性对照,在荧光显微镜下观察样本。 |
所属类别: | 发明专利 |