专利名称: |
甲型肝炎病毒抗原检测方法 |
摘要: |
本发明提供一种甲型肝炎病毒抗原检测方法。即采用长臂生物素标记HAV-IgG,以
辣根过氧化物酶标记链霉亲和素作放大系统,对甲型肝炎病毒抗原进行检测时,由于
长臂生物素比一般生物素有更长的间臂,能减少空间位阻,使几个生物素化分子能同
时与一个亲和素复合物结合,加之长臂生物素为水溶性生物素,直接标记抗甲型肝炎
病毒抗体可减少免疫检测中的步骤,缩短检测时间,即由通常的2天缩短为全程检测
只需3.5小时,并可通过降低交叉反应而降低背景,提高检测灵敏度;另外,由于辣
根过氧化物酶标记的链霉亲和素与亲和素不同,其分子量大约为60000,不含碳水化合
物,非特异性结合较亲和素低,所以具有提高灵敏度及特异性的效果。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
云南;53 |
申请人: |
中国医学科学院医学生物学研究所 |
发明人: |
龙润乡;谢忠平;李 华;宋 霞;陈洪波;洪 超;白惠珠;杨 蓉;黄 铠 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2009-05-22T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-01-01T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN200910094508.1 |
公开号: |
CN101556284 |
代理机构: |
昆明正原专利代理有限责任公司 |
代理人: |
徐玲菊 |
分类号: |
G01N33/576(2006.01)I |
申请人地址: |
650000云南省昆明市五华区茭菱路379号 |
主权项: |
1、一种甲型肝炎病毒抗原检测方法,其特征在于经过下列步骤:
A、按50~150μl/孔的量,将待检甲型肝炎病毒抗原、抗原阳性对照和抗原阴性对
照分别加入酶标板的孔中,并留空白调零孔,放入湿盒中,于37℃保温1~3小时后,
洗板3~5次;
B、按50~150μl/孔的量,在A步骤的酶标板的各孔中,加入稀释度为1∶500~3000
的长臂生物素标记HAV抗体使用液,放入湿盒中,于37℃保温0.5~1小时后洗板3~5
次;
C、按50~150μl/孔的量,在B步骤的酶标板的各孔中,加入稀释度为1∶2000~10000
的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素使用液,放入湿盒中,于37℃保温0.5~1小时后
洗板3~5次;
D、在C步骤的酶标板的各孔中,分别加入TMB显色液A和B各50μl/孔,混匀,
放入湿盒中,37℃保温10~15分钟;
E、在D步骤的酶标板的各孔中,按50~100μl/孔的量加入终止液后置于酶标仪上,
在450nm波长下,用空白孔调零后检测吸光度A值,即得检测结果。 |
所属类别: |
发明专利 |