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一种微生物降解苯环的酶活测试方法
| 专利名称： | 一种微生物降解苯环的酶活测试方法 |
| 摘要： | 本发明公开一种微生物降解苯环的酶活测试方法，该测试方法包括：1.制作底物浓度与吸光度之间关系的标准曲线，找出底物浓度与吸光度之间线性拟合方程；2.根据待测活力的酶或菌悬液的催化条件，配制底物溶液；3.将底物溶液和酶液预先分别加热到各自最适反应温度，然后混合并在最适反应条件下催化反应，反应后检测底物浓度变化；4.测定反应液中的苯环含量：稀释催化反应前后的反应液，使其吸光度在线性方程范围内，并在最大吸收波长下测试其吸光度，然后根据线性方程计算反应前后的底物浓度；5.计算依据公式（1）：酶活U=△C/M/△t×103，计算获得微生物降解苯环的酶活。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 天津;12 |
| 申请人： | 天津工业大学 |
| 发明人： | 张健飞;张卫玲;李政;巩继贤;李秋瑾 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2010-08-31T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201010267542.7 |
| 公开号： | CN101936909A |
| 代理机构： | 天津翰林知识产权代理事务所(普通合伙) 12210 |
| 代理人： | 李济群 |
| 分类号： | G01N21/75(2006.01)I |
| 申请人地址： | 300160 天津市河东区成林道63号 |
| 主权项： | 一种微生物降解苯环的酶活测试方法，该测试方法包括以下步骤：(1) 制作底物浓度与吸光度之间关系的标准曲线：配制一系列不同含苯环浓度的底物溶液，并在紫外分光光度计上进行全波长扫描，进而确定不同含苯环浓度的底物溶液的最大吸收波长，然后在其最大吸收波长下测定不同含苯环浓度的底物溶液的吸光度，绘制底物浓度与吸光度之间关系的标准曲线图，找出底物浓度与吸光度之间线性拟合度达到0.999以上的底物浓度范围，拟合得到用于计算降解过程中苯环含量变化的线性方程；所述底物为含苯环的物质；(2) 配制底物溶液：根据待测活力的酶或菌悬液的催化条件，配制底物溶液；(3) 催化反应：将底物溶液和酶液预先分别加热到各自最适反应温度，然后将底物溶液和酶液混合为反应液，在最适反应条件下，使之发生催化反应，并开始计时，经过催化反应设定的时间后，取出反应液，迅速高温灭活，检测底物浓度变化；(4)测定反应液中的苯环含量：将上述催化反应前后的反应液稀释相应倍数，使其吸光度在所述线性方程范围内；稀释后的反应液在最大吸收波长下测试反应前后的吸光度，并根据所述线性方程计算反应前后的底物浓度；(5) 计算微生物降解苯环的酶活：依据下述公式（1），计算获得微生物降解苯环的酶活：酶活U=△C/M/△t×103 （1）（1）式中，△C表示催化反应前后反应液中底物的浓度变化，单位为g/L；M表示底物的相对分子量，单位为g/mol，△t表示催化反应时间，单位为min；103为各个量的单位与规定酶活单位之间的校正量。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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