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一种利用斑马鱼筛选线粒体靶向化合物的方法
| 专利名称： | 一种利用斑马鱼筛选线粒体靶向化合物的方法 |
| 摘要： | 本发明涉及化合物检测领域，具体涉及一种利用斑马鱼筛选线粒体靶向化合物的方法，主要包括斑马鱼选取、化合物处理、染色处理和定量/定性分析几个步骤，其中所述的染色处理是指将经过化合物处理后的斑马鱼采用JC-1或DASPEI作为染色剂在28℃下染色处理0.5-1个小时。本发明弥补了现有技术无法实现体内检测线粒体损伤的不足，提供了一种方便快捷、经济实用的利用斑马鱼筛选线粒体靶向化合物的体内实验分析方法，具有高通量、特异性强的特点。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 陕西;61 |
| 申请人： | 彭恩泽 |
| 发明人： | 彭恩泽 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2010-09-29T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201010296696.9 |
| 公开号： | CN101968484A |
| 代理机构： | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 |
| 代理人： | 林宝堂 |
| 分类号： | G01N33/543(2006.01)I |
| 申请人地址： | 710001 陕西省西安市碑林区兴隆巷48号 |
| 主权项： | 一种利用斑马鱼筛选线粒体靶向化合物的方法，主要包括以下步骤：（1）斑马鱼选取选取受精后2?7天的正常发育的斑马鱼，放入微孔板中，（2）化合物处理A方案：移除微孔板中的养殖用水，然后按照待测化合物处理组、线粒体损伤阳性对照组、溶剂对照组、空白对照组，根据微孔板的规格分别加入相应的待测化合物溶液、线粒体损伤诱导剂溶液、溶剂、养殖用水，然后微孔板于28℃下恒温培养6?72小时，其中：待测化合物溶液浓度为0.1?1000μM，或者B方案：移除微孔板中的养殖用水，然后按照待测化合物组合处理组、线粒体损伤模型组、线粒体保护阳性对照组、溶剂对照组、空白对照组，根据微孔板的规格分别加入相应的待测化合物+线粒体损伤诱导剂的混合溶液、线粒体损伤诱导剂溶液、线粒体损伤诱导剂+线粒体保护剂的混合溶液、溶剂、养殖用水，然后微孔板于28℃下恒温培养6?72小时，其中：待测化合物溶液浓度为0.1?1000μM，（3）JC?1或DASPEI染色处理将溶剂对照组随机分为两组，其中一组不染色作为背景组，另外一组与其他组进行染色处理，步骤如下：A、移除微孔板中的液体，根据微孔板的规格加入10μM?JC?1或1mM?DASPEI；B、将微孔板置于28℃恒温中培养0.5?1小时；C、移除微孔板中的液体，用养殖用水清洗；D、微孔板中根据微孔板的规格加入养殖用水，于28℃恒温中培养5分钟；E、重复实验操作D）2?3次；F、将斑马鱼转入新的微孔板中，移除微孔板中的液体，根据微孔板的规格加入养殖用水，（4）多功能微孔板分析仪定量分析或/和荧光显微镜定性分析。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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