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一种基于细胞荧光图像的药物筛选方法
| 专利名称： | 一种基于细胞荧光图像的药物筛选方法 |
| 摘要： | 本发明提供一种基于细胞荧光图像的药物活性组分筛选方法，通过控制荧光倒置显微镜上的高精度可控电动平台精确走位，应用荧光探针特异性标记细胞、细胞显微图像自动获取、荧光图像识别及数据生成，通过分析图像信息来获取心肌细胞保护作用的相关指标筛选和评价活性组分。本发明能够在活细胞内通过标记线粒体荧光强度来测量心肌细胞的活力状态从而对活性物质的保护效果进行评估，并能够对细胞的形态结构和分布进行实时监测，具有快速、经济、高通量的特征，可在定量筛选评价心血管疾病治疗药物中的应用。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 浙江;33 |
| 申请人： | 浙江大学 |
| 发明人： | 程翼宇;王毅;赵筱萍 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2010-10-09T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201010500640.0 |
| 公开号： | CN101982775A |
| 代理机构： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 |
| 代理人： | 张法高;赵杭丽 |
| 分类号： | G01N33/543(2006.01)I |
| 申请人地址： | 310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 |
| 主权项： | 一种基于细胞荧光图像的药物活性组分筛选方法，其特征是：通过控制荧光倒置显微镜上的高精度可控电动平台精确走位，应用荧光探针特异性标记细胞、细胞显微图像自动获取、荧光图像识别及数据生成，通过分析图像信息来获取心肌细胞保护作用的相关指标筛选和评价活性组分，具体通过以下步骤实现：(1)建立筛选模型：接种H9C2细胞于48孔板或96孔板，使其贴壁后以H2O2孵育，H2O2孵育时间为15、30、90以及120分钟，使用荧光染料标记细胞后读取荧光图像，荧光拍摄参数为：绿色荧光滤光片或者红色荧光滤光片，扫描所得图像经过荧光图像拼接、识别软件处理并进行统计，通过绘制相对荧光强度的时效曲线确定最佳损伤时间，通过绘制相对荧光强度的量效曲线确定最佳损伤浓度，该最佳浓度即作为心肌细胞损伤模型，最佳染色浓度为10μg/mL；(2)筛选和评价：接种H9C2细胞于96孔板，贴壁后加药保护一定时间，用(1)所述的筛选模型进行损伤并检测荧光强度，并经过荧光图像拼接、图像识别以及数据输出系统将结果进行统计，计算公式为：其中Fm为模型组即损伤组的荧光强度，f为加药保护组的荧光强度，Fc为正常未处理组的荧光强度；在筛选中设定正常细胞组、阳性对照组及溶剂对照组，通过计算保护率为正即判断具有保护作用，超过50％即判断具有较强的保护作用。FSA00000294414100011.tif |
| 所属类别： | 发明专利 |
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