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原文传递 一种单细胞或组织微粒悬液的制备方法及用途
专利名称: 一种单细胞或组织微粒悬液的制备方法及用途
摘要: 一种单细胞或组织微粒悬液,属于生物医学技术领域。它由下列步骤制备而成:1)组织样品的收集;2)单细胞或组织微粒的缓冲液制作;3)单细胞或组织微粒的缓冲液洗涤;4)单细胞或组织微粒悬液的制备。本发明通过将多种具有阳性对照意义的单细胞或组织微粒或一种具有多种阳性对照意义的单细胞或组织微粒进行组合,只要点一点该悬液即可作为对照物,不需要进行切片,简化了检测步骤;还可以用于原位杂交、FISH技术及一些病原体的染色,运用范围广;单细胞或组织微粒悬液保存方便、易于长期保存、可反复使用;确保了检测结果的准确性,便于推广、普及,有望全面轻松解决免疫组织化学等原位检测方法质量控制对照问题。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 浙江;33
申请人: 杭州市中医院
发明人: 任兴昌;刘卫艳
专利状态: 有效
申请日期: 2010-10-20T00:00:00+0800
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201010512725.0
公开号: CN101957282A
代理机构: 杭州浙科专利事务所 33213
代理人: 吴秉中
分类号: G01N1/28(2006.01)I
申请人地址: 310007 浙江省杭州市体育场路453号杭州市中医院
主权项: 一种单细胞或组织微粒悬液,其特征在于其制备方法如下步骤:1)切取并收集对照目标物丰富的组织,用10%中性福尔马林固定液固定,或直接收集留存已经确定有某些特定抗原、抗体标记阳性的用福尔马林固定液及时固定后的组织备用;2)将步骤1)得到的组织切成为2mm10mm的小块,放入打碎器中,加入缓冲液进行打碎12min,所述的组织与缓冲液的体积比为1:1100,弃去组织残渣,得到含单细胞或组织微粒的缓冲液;3)将步骤2)中得到的含单细胞或组织微粒的缓冲液过滤,100400目筛网过筛去除过大细胞,再放入离心机中以20003000r/min的速度离心515min,弃去上层清液,向下层单细胞或组织微粒中加入与其体积比为1:15的缓冲液,充分震荡后浸泡13h,离心弃去上层清液,重复操作35次,直至无福尔马林气味溢出为止,得到洗净的单细胞或组织微粒;4)将步骤3)得到的单细胞或组织微粒放入保存液中保存,得到单细胞或组织微粒悬液,并进行涂片按常规免疫组织化学方法确定阳性细胞所占比例,所述的单细胞或组织微粒与保存液的体积比为1:13,所述的保存液的制备:取0.050.1mol/L、PH为7.4的三羟甲基氨基甲烷100ml,加温到6070℃,加入优质明胶50100mg,搅拌溶解后,冷却至室温,加入0.10.8g牛血清白蛋白,加入NaN3200mg溶解后过滤制成。
所属类别: 发明专利
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