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原文传递 一种动物组织脂肪氧化酶活性的定量检测方法
专利名称: 一种动物组织脂肪氧化酶活性的定量检测方法
摘要: 本发明提供了一种动物组织脂肪氧化酶活性的定量检测方法,具体步骤为:(1)配制粗酶液和底物液;(2)于粗酶液中加入10倍体积的底物液,在20~30℃水浴缓慢震荡,反应20~30min,加入4倍粗酶液体积的无水乙醇终止反应,离心,取上清液0.5mL加入2mL无水乙醇,并用7.5mL质量浓度为60%乙醇稀释成测定液,并制备空白对照液,于234nm处测定吸光度;(3)绘制脂肪氧化酶酶活力与吸光度的标准曲线,将测得的吸光度与反应体系中脂肪氧化酶浓度相对应,根据脂肪氧化酶标准样品的酶活力单位,将不同样品的脂肪氧化酶活力进行量化。本发明的定量检测方法灵敏度高,稳定性和重现性好,操作方便,对设备要求低,且避免了底物液和粗酶液对测定带来的干扰。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 湖南;43
申请人: 长沙理工大学
发明人: 刘永乐;王建辉;王发祥;李向红;俞健;刘冬敏
专利状态: 有效
申请日期: 2011-10-25T00:00:00+0800
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201110326420.5
公开号: CN102507488A
代理机构: 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113
代理人: 马强
分类号: G01N21/33(2006.01)I
申请人地址: 410004 湖南省长沙市雨花区万家丽南路二段960号
主权项: 一种动物组织的脂肪氧化酶活性的定量检测方法,包括如下步骤:(1)粗酶液和底物液的配制;所述粗酶液是:待测的动物组织经捣碎后,用磷酸盐缓冲溶液浸提,再经两次盐析、透析纯化后得到粗酶液;所述底物液是:由0.2g~0.3g吐温?20和0.7mmol~0.8mmol亚油酸在pH值为6.5~7.5的磷酸缓冲液中配制成的底物液;(2)制备脂肪氧化酶样品的测定液及对照液,测定吸光度;将粗酶液中加入底物液中,加入4倍粗酶液体积的无水乙醇终止反应,离心,取上清液加入无水乙醇,并用质量浓度为60%乙醇稀释成测定液;在同样反应
所属类别: 发明专利
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