专利名称: |
一种小分子单羧酸衍生-液相色谱检测法 |
摘要: |
一种小分子单羧酸衍生‑液相色谱检测法,色谱条件为定量检测波长为223 nm,色谱柱为Agilent SB‑C18,柱温箱温度为35℃;以乙腈和水作为流动相,0.8 mL/min的固定流速;梯度洗脱程序为:0分钟时乙腈体积比例为10%,30分钟时升至70%,32分钟时再降为10%,34分钟时程序结束。本发明提出的几种单羧酸衍生‑液相色谱检测法具有定性定量准确、灵敏度比直接法提高至少2个数量级,并且可以测定丁酸,优势非常明显。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
江苏;32 |
申请人: |
中国科学院南京土壤研究所;南京林业大学 |
发明人: |
陈虹;钟明;靳伟;唐昊冶;陈捷;俞元春 |
专利状态: |
有效 |
发布日期: |
2019-01-01T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201810437639.4 |
公开号: |
CN108562670A |
代理机构: |
南京经纬专利商标代理有限公司 32200 |
代理人: |
唐循文 |
分类号: |
G01N30/02(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02 |
申请人地址: |
210008 江苏省南京市玄武区北京东路71号 |
主权项: |
1.一种小分子单羧酸衍生‑液相色谱检测法,其特征在于步骤为:色谱条件:定量检测波长为223 nm,色谱柱为Agilent SB‑C18,柱温箱温度为35℃;以乙腈和水作为流动相,0.8 mL/min的固定流速;梯度洗脱程序为:0分钟时乙腈体积比例为10%,30分钟时升至70%,32分钟时再降为10%,34分钟时程序结束;衍生化反应所需的试剂溶液的配制:EDC溶液30‑60 mmol/L;MES溶液30‑60 mmol/L,用NaOH溶液调pH值为5‑6.7;NHS溶液20‑90mmol/L;衍生试剂胺基化合物溶液30‑60 mmol/L,用丙酮或乙腈助溶;标准溶液配制:配制4种单羧酸混合标准母液为:甲酸、乙酸、丙酸、丁酸均为100 mg/L;衍生化反应:标准溶液的衍生化反应:分别取0‑1 mL的4种单羧酸混合标准母液加入5 mL的刻度试管中,再分别加入0.1‑0.6 mL EDC溶液、0.2‑1.0 mL的MES溶液,20分钟后加入0.1‑0.5 mL NHS溶液、反应溶液的pH值控制在5.0‑6.0之间,静置反应0.5‑1小时后,再加入0.1‑1.0 mL的衍生试剂胺基化合物溶液,静置反应溶液10‑20 小时,最后用超纯水定容至5mL,仪器待测;整个反应过程在室温条件下完成,反应体系中羧酸:EDC:NHS摩尔比=1:(1~4):(1~2)的范围,羧基:胺基物质的摩尔比为2‑4之间;样品溶液的衍生化反应:步骤同标准溶液的衍生化反应,取样量0.5‑1.0 mL;含量测定:精密吸取衍生化反应后的标准溶液及样品溶液各20 μL,注入液相色谱仪,测定,即得结果。 |
所属类别: |
发明专利 |