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原文传递一种检测β-内酰胺酶的方法及试剂盒

专利名称：	一种检测β-内酰胺酶的方法及试剂盒
摘要：	本发明属于食品安全检测领域，涉及一种检测β‑内酰胺酶的方法。该方法对现有方法中涉及的各参数进行了优化，由此将对β‑内酰胺酶的检测限优化到低至1U/mL或0.2IU/L，提高了系统的稳定性和灵敏度，拓宽了现有方法的适用范围。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京市饲料监察所（北京市饲料质量监督检验站）
发明人：	郑君杰;方芳;裘燕;孙志伟;李征;贾涛;刘钧
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201711319876.2
公开号：	CN108037286A
代理机构：	北京汇知杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11587
代理人：	杨巍;蔡伦
分类号：	G01N33/573(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/573
申请人地址：	100107 北京市朝阳区安定门外北苑甲15号
主权项：	一种检测β‑内酰胺酶的方法，所述方法包括以下步骤：a)利用含有1×10⁸‑9×10⁸/mL藤黄微球菌(Micrococcus luteus)的抗生素检测用培养基铺板，由此制备检验用平板；b)制备四个样品用检测系，分别为第一样品用检测系、第二样品用检测系、第三样品用检测系和第四样品用检测系，其中，所述第一样品用检测系包含：待测样品、青霉素，所述第二样品用检测系包含：待测样品、舒巴坦、青霉素，所述第三样品用检测系包含：待测样品、β‑内酰胺酶、青霉素，所述第四样品用检测系包含：待测样品、β‑内酰胺酶、舒巴坦、青霉素，并且在所述四个样品用检测系中，在所述待测样品为1000微升的情况下，所述β‑内酰胺酶在存在时为33.75‑75U或者0.01‑0.015IU，所述舒巴坦在存在时为20‑30微克，所述青霉素为0.1‑0.25微克；制备四个对照用检测系，分别为第一对照用检测系、第二对照用检测系、第三对照用检测系和第四对照用检测系，其中除将待测样品替换为无菌水外，所述四个对照用检测系的其余组分及其含量与所述四个样品用检测系的组分和含量相同；c)将步骤b)的四个样品用检测系和四个对照用检测系分别加至步骤a)制备的检验用平板的不同位置，之后培养一段时间，随后测量各抑菌圈直径；d)对检测结果进行判定：若对照结果如下：(1)第一对照用检测系、第二对照用检测系、第三对照用检测系所在位置处均产生抑菌圈；(2)第一对照用检测系所在位置处的抑菌圈与第二对照用检测系所在位置处的抑菌圈差异小于等于3.0mm；(3)第三对照用检测系所在位置处的抑菌圈小于第四对照用检测系所在位置处的抑菌圈且差异大于等于3.0mm；则系统成立，此时对样品结果判断如下：(1)若第一样品用检测系所在位置处的抑菌圈小于第二样品用检测系所在位置处的抑菌圈且差异大于等于3mm，则判断该待测样品中添加有β‑内酰胺酶，检验结果为阳性；(2)若第一样品用检测系所在位置处的抑菌圈与第二样品用检测系所在位置处的抑菌圈之间的差异小于3mm时，则判断该待测样品中未添加有β‑内酰胺酶，检验结果为阴性；(3)若第一样品用检测系所在位置处与第二样品用检测系所在位置处均不产生抑菌圈，则对待测样品进行稀释，再重复步骤a)‑步骤d)。
所属类别：	发明专利