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原文传递一种脑组织冰冻切片的制备方法

专利名称：	一种脑组织冰冻切片的制备方法
摘要：	本发明公开了一种脑组织冰冻切片的制备方法，属于生物学、医学实验领域，包括以下步骤：(1)组织取材及固定脱水：将动物脑组织进行固定和梯度脱水；(2)冷冻预处理：用PBS溶液冲洗脑组织并拭干，修平脑组织，用锡箔纸包裹，于冰冻切片机快速制冷区域冰冻后移出，等待处理；(3)半包埋处理：将脑组织进行半包埋处理，静置1分钟；(4)冰冻切片：将样品托固定于切片机探头上，作连续冠状冰冻切片。(5)切片收集：将所需部位的切片收集于盛有冰冻保存液的6孔板内，切片于‑20℃长期保存。本发明采用半包埋处理脑组织，可避免包埋剂对脑组织的影响，切片完整齐全，无冰晶形成，免疫荧光染色良好。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东中医药大学
发明人：	刘小菊;陈丹;李宁;张美芝;高杰;王枭宇;王海娟
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201810330147.5
公开号：	CN108572105A
代理机构：	北京中济纬天专利代理有限公司 11429
代理人：	张祥明
分类号：	G01N1/42(2006.01)I;G01N1/30(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N1;G01N1/42;G01N1/30
申请人地址：	250355 山东省济南市长清大学科技园46555号
主权项：	1.一种脑组织冰冻切片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)组织取材及固定脱水：使用心脏灌流取脑法取出动物脑组织，使用多聚甲醛进行固定，然后利用10％、20％、30％蔗糖溶液进行梯度脱水；(2)冷冻预处理：将冰冻切片机和样品托提前预冷，用PBS溶液冲洗脑组织后用吸水纸拭干，修平脑组织，用锡箔纸包裹，放在冰冻切片机快速制冷区域冰冻，之后从快速制冷区域移出，等待处理；(3)半包埋处理：在样品托上浅涂一层包埋剂打底，厚度为1mm，当包埋剂开始变白时，厚涂一层包埋剂，厚度为3mm，将脑组织小心迅速放入包埋剂中，浅浅包裹脑组织底部，上述操作均在冰冻切片机中进行。(4)冰冻切片：将样品托固定于切片机探头上，作连续冠状冰冻切片；(5)切片收集：将所需部位的切片收集于盛有冰冻保存液的6孔板内，每孔依次放入切片，每一部位均可收集6套切片，切片于‑20℃长期保存。
所属类别：	发明专利