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原文传递 一种孕酮检测试剂盒的制备方法
专利名称: 一种孕酮检测试剂盒的制备方法
摘要: 本发明公开了一种孕酮检测试剂盒的制备方法,包括如下步骤:(1)按试剂R1组分含量,将MOPSO溶于纯化水,调节pH,制成R1缓冲液;将NaN3、海藻糖、曲拉通、PEG‑2000溶于R1缓冲液,得试剂R1;(2)按试剂R2组分含量,将MOPSO溶于纯化水,调节pH,制成R2缓冲液;将NaCl、NaN3、酪蛋白、甘油溶于R2缓冲液,得R2分散液;制备胶乳包被的孕酮多克隆抗体;用R2分散液来溶解得到的胶乳包被的孕酮多克隆抗体,超声分散,得试剂R2。本发明的优点在于:(1)制备的试剂盒灵敏度高,操作简单、快速;(2)制备的试剂盒稳定性佳,特异性强;(3)制备的试剂盒可用于全自动生化分析仪上。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 安徽;34
申请人: 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司
发明人: 吴泽东;庄庆华;吴铮;丁先骏;朱雨;周珍珍
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201710915787.8
公开号: CN107727871A
代理机构: 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙) 34124
代理人: 王志兴
分类号: G01N33/74(2006.01)I;G01N33/543(2006.01)I;G01N33/544(2006.01)I;G01N33/531(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/74;G01N33/543;G01N33/544;G01N33/531
申请人地址: 236000 安徽省合肥市包河经济开发区繁华大道与吉林路交口东南角联东U谷第一期18号楼1-4层
主权项: 一种孕酮检测试剂盒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)按照下列组分含量配制试剂R1:试剂R1:①按照上述试剂R1的组分含量,将MOPSO溶于纯化水中,搅拌均匀,调节pH,配制成R1缓冲液;②按照上述试剂R1的组分含量,将NaN3、海藻糖、曲拉通、PEG‑2000溶于R1缓冲液中,搅拌均匀,待所有原料充分溶解,即制得试剂R1;(2)按照下列组分含量配制试剂R2:试剂R2:①按照上述试剂R2的组分含量,将MOPSO溶于纯化水中,搅拌均匀,调节pH,配制成R2缓冲液;②按照上述试剂R2的组分含量,将NaCl、NaN3、酪蛋白、甘油溶于R2缓冲液中,搅拌均匀,即得R2分散液;③制备胶乳包被的孕酮多克隆抗体:a.取粒径为80nm和120nm的胶乳微球于MES缓冲液中,加入EDAC溶液混匀后于37℃环境中孵育混匀1h,离心去上清;再加入NHS溶液恢复至原体积后,混匀于37℃环境中孵育混匀1h,离心去上清,得混合微球乳液;b.在混合微球乳液中加入聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物,共聚80nm和120nm粒径的胶乳;离心沉淀,将剩余物质分散于MES缓冲液中,反复2‑4次,最后于MES缓冲液中恢复至原体积,再加入孕酮多克隆抗体,于37℃下反应3‑4h,离心,将沉淀物分散于原体积的PBS缓冲液中,反复2‑4次,最后将沉淀物分散于原体积的NHS缓冲液中,加入BSA;c.2‑8℃封存45‑50h,得最终所需的胶乳包被的孕酮多克隆抗体;④用R2分散液来溶解得到的胶乳包被的孕酮多克隆抗体,超声分散,最终制得试剂R2;其中,聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物在试剂R2中的最终浓度为9%‑11%。
所属类别: 发明专利
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