专利名称: |
利用红细胞DNA损伤信号预测血液病转归的方法及其应用 |
摘要: |
本发明公开一利用红细胞DNA损伤信号预测血液病转归的方法,包括以下步骤:S1:准备血样本:S2:准备对照组和实验组:S3:染色第二实验组以及重悬第二对照组:S4:处理染色实验组:S5:核酸染色;S6:流式方法检测所述检测实验组;以及S7:分析所述分析结果,通过快速判断早期受损的红细胞中的DNA损伤信号的方式预测血液病的转归情况,具有特异性强以及灵敏度高的优势。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
浙江;33 |
申请人: |
西湖大学 |
发明人: |
高晓飞;张清;葛建萍;楼赛 |
专利状态: |
有效 |
发布日期: |
2019-01-01T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201810516900.X |
公开号: |
CN108398361A |
代理机构: |
无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙) 32260 |
代理人: |
张欢勇 |
分类号: |
G01N15/00(2006.01)I;G01N15/10(2006.01)I;G01N15/14(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N15;G01N15/00;G01N15/10;G01N15/14 |
申请人地址: |
310024 浙江省杭州市西湖区转塘街道石龙山街18号 |
主权项: |
1.一利用红细胞DNA损伤信号预测血液病转归的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:准备血样本:获取血液疾病患者的抗凝血样本,按照1%体积比将所述抗凝血样本在室温环境下固定于1%‑4%的多聚甲醛溶液当中,固定10‑20分钟后,形成含有血样本的固定液;S2:准备对照组和实验组:分别取用相同体积的固定液设置为第一对照组和第一实验组,所述第一对照组和所述第一实验组均在室温环境下300‑400g离心,弃上清液,随后用1*PBS重悬清洗2‑3次,得到处理过后的第二对照组和处理过后的第二实验组;S3:染色第二实验组:取所述第二实验组加入Human FcR Binding,在4摄氏度下孵育15‑20分钟,随后使用染色缓冲剂在室温避光环境下染色所述第二实验组,得到第三实验组,其中所述染色缓冲剂为含RNase的染色试剂以及核酸染色剂的组合,染色15‑30分钟,其中所述含RNase的染色试剂为含第一标记物标记的CD235a以及第二标记物标记的CD47,所述核酸染色剂为含Hoechst33342和Thiazole orange的1×PBS,其中所述第一标记物不同于所述第二标记物;S4:重悬第二对照组:使用1*PBS重悬所述第二对照组,得到第三对照组;S5:流式方法检测所述第三实验组以及所述第三对照组:将所述第三实验组和所述第三对照组放置于流式细胞仪中检测,得到分析结果;以及S6:分析所述分析结果。 |
所属类别: |
发明专利 |