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一种定量检测α-葡萄糖苷酶活性的方法
| 专利名称： | 一种定量检测α-葡萄糖苷酶活性的方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种定量检测α‑葡萄糖苷酶活性的方法。首先，邻苯二胺（OPD）被MnO2纳米片氧化生成荧光产物2,3‑二氨基吩嗪（DAP），与加入的AgNCs发生内滤效应，使AgNCs的荧光被猝灭，根据DAP和AgNCs的荧光强度比构成比率荧光探针；其次，底物AAG在α‑葡萄糖苷酶的催化下产生抗坏血酸，将MnO2纳米片还原为不具有类氧化酶的Mn2+，无法将OPD氧化生成DAP，因此，DAP的荧光强度降低，而AgNCs的荧光强度增加。最后，根据DAP和AgNCs两者荧光强度的比值对α‑葡萄糖苷酶的浓度进行定量检测，该方法灵敏度高、选择性好，而且检测简便。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 南京医科大学 |
| 发明人： | 胡琴;时梦岚;许贯虹;魏芳弟;岑瑶;徐晓曼;程霞;柴煜莹 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810272869.X |
| 公开号： | CN108918478A |
| 代理机构： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 |
| 代理人： | 曹翠珍 |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/64 |
| 申请人地址： | 210029 江苏省南京市汉中路140号 |
| 主权项： | 1.一种定量检测α‑葡萄糖苷酶活性的方法，步骤如下：（1）、制备MnO2纳米片；（2）、制备AgNCs；（3）、将不同浓度的α‑葡萄糖苷酶与底物AAG于37℃孵育后，底物AAG在α‑葡萄糖苷酶的催化下产生抗坏血酸；（4）、加入MnO2纳米片，产生的抗坏血酸将MnO2纳米片还原为不具有类氧化酶的Mn2+；（5）、再加入邻苯二胺，继续反应，邻苯二胺在MnO2纳米片的类氧化酶作用下，氧化生成荧光产物2,3‑二氨基吩嗪；不具有类氧化酶的Mn2+，无法将邻苯二胺氧化生成荧光产物2,3‑二氨基吩嗪；（6）、加入AgNCs，荧光产物2,3‑二氨基吩嗪与AgNCs发生内滤效应，从而使得AgNCs的荧光被猝灭；（7）、根据荧光产物2,3‑二氨基吩嗪和AgNCs两者荧光强度的比值对α‑葡萄糖苷酶的浓度绘制标准曲线；（8）、根据标准曲线，获得样品中α‑葡萄糖苷酶的浓度，完成对α‑葡萄糖苷酶的定量检测。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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