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基于DNA两面性的电化学传感器构建方法及其端粒酶活性检测应用
| 专利名称： | 基于DNA两面性的电化学传感器构建方法及其端粒酶活性检测应用 |
| 摘要： | 本发明公开了一种基于DNA两面性电化学传感器构建方法及其端粒酶活性检测应用。在端粒酶存在时，端粒酶引物发生延伸的产物与发夹DNA杂交形成双链，核酸外切酶III将该双链中发夹DNA与端粒酶延伸产物杂交部分的单核苷酸逐个剪切出来，同时释放出端粒酶引物延伸产物和富含A碱基的短DNA单链，释放出来的端粒酶延伸产物可再次与发夹DNA杂交并被核酸外切酶III剪切，从而形成循环释放更多的富含A碱基的短DNA单链，而富含A碱基的短DNA单链可通过A碱基与金的相互作用修饰到金电极上，该短DNA单链的磷酸基团可吸附CeO2‑TiO2复合纳米棒，从而增加了电极表面的空间位阻及对[Fe(CN)6]3‑/4‑的静电排斥，减弱了[Fe(CN)6]3‑/4‑的电化学信号，根据电化学信号的大小可实现细胞中端粒酶活性的灵敏检测。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江西;36 |
| 申请人： | 南昌大学 |
| 发明人： | 邱建丁;王艺;梁汝萍 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810774966.9 |
| 公开号： | CN108982628A |
| 代理机构： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 |
| 代理人： | 赵艾亮 |
| 分类号： | G01N27/327(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N27;G01N27/327 |
| 申请人地址： | 330000 江西省南昌市红谷滩新区学府大道999号 |
| 主权项： | 1.基于DNA两面性的电化学传感器构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将5μL从不同数量细胞中提取出来的端粒酶提取物、2.5μL 10mM端粒酶引物DNA、5μL 10mM脱氧核糖核苷三磷酸以及37.5μL 20mM Tris‑HCl反应缓冲溶液混合，于37℃孵育1.5h，之后，再加入4μM发夹DNA和100U核酸外切酶III，于37℃孵育2.5h后，溶液中生成富含A碱基的短DNA单链，将金电极浸泡于溶液中过夜，制成DNA修饰金电极；(2)将4μL 10mg/mL的CeO2‑TiO2复合纳米棒溶液滴涂到步骤(1)制成的DNA修饰金电极表面，在室温下晾干，制成CeO2‑TiO2/DNA修饰金电极，即电化学传感器。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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