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一种NGAL纳米高效检测试纸的制备方法
| 专利名称： | 一种NGAL纳米高效检测试纸的制备方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种NGAL纳米高效检测试纸制备方法，包括设在固定板上依次相连的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫；在硝酸纤维素膜上设有检测线抗体和质控线抗体；在金标垫上设有金标抗体，所述的样品垫为玻璃纤维棉制成的垫，所述的金标垫为羧化纤维素膜制成的垫，所述的金标抗体为显色抗体，检测线抗体为捕捉抗体，显色抗体与捕捉抗体为2株可互相配对形成夹心的抗人H‑FABP单克隆抗体，所述的金标抗体用40nm纳米金壳标记，所述金标垫上设有功能层。本发明通过特制的含有特定功能层的金标垫，使得金标释放速度放缓，得到缓冲，从而使样本中被分析物与金标抗体的浓度比值增大，从而提高了试纸条检测的灵敏度。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 南京博天科智生物技术有限公司 |
| 发明人： | 张雷 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810225514.5 |
| 公开号： | CN108490190A |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01)I;G01N33/577(2006.01)I;G01N21/78(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N21;G01N33/68;G01N33/577;G01N21/78 |
| 申请人地址： | 210000 江苏省南京市江宁区龙眠大道568号紫金（方山）科技创业特别社区紫金北五幢北楼三层 |
| 主权项： | 1.一种NGAL纳米高效检测试纸的制备方法，其特征在于，包括设在固定板上依次相连的样品垫(1)、纳米材料垫(2)、硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)；所述硝酸纤维素膜(3)上设有检测线抗体(5)和质控线抗体(6)；所述纳米材料垫(2)为羧化纤维素膜制成的垫，纳米材料垫(2)设有金包银纳米金壳复合物，所述的样品垫(1)为玻璃纤维棉制成的垫，所述纳米材料垫上设有功能层；所述功能层以质量分数计由12％纯硝酸银、70％明胶、6％的司本80、4％的环糊精，碱剂6‑8％、硫酸铜0.1‑0.4％、络合剂0.5‑1％组成；其制备步骤包括如下：(1)纳米金壳溶液的制备；(2)金壳标记制备和确认金包银壳纳米材料尺寸和纯度确定；(3)纳米材料垫的制备：将羧化纤维素膜预处理后，烘干，通过真空环境中通过红外喷涂设备分别将配制好的12％纯硝酸银、70％明胶、6％的司本80、4％的环糊精，碱剂6‑8％、硫酸铜0.1‑0.4％、络合剂0.5‑1％喷涂至羧化纤维素膜好形成纳米材料；(4)金包银纳米金壳复合物的制备，即将信号抗体与10nm和50nm金包银壳标记物相联的复合物；用0.1MK2CO3调节pH8.5‑9.0；将NGAL信号单抗与纳米壳比例调整为4:100(μg/ml)；将单链DNA3'端标有生物素的30‑80bpSSDNA与纳米壳信号抗体价链联接反应6‑8小时，25℃，其终浓度为0.5‑2.0μM；将SSDNA与纳米壳信号抗体复合物加进PEG8000终浓度为0.2‑1.0％，2MNaCl/20mMphosphate调节SSDNA纳米壳复合体pH至7.4；将上述pH7.4复合体与链亲和素、辣根过氧化酶，终浓度0.4μM，在25℃条件下，孵育4小时，离心，沉淀清洗3次，保存4℃备用；(5)金壳纳米材料垫制备；(6)硝酸纤维素膜预处理和备用；(7)制备和组装金壳纳米材料垫；(8)检测线制备；(9)质控线制备；(10)试纸条装配。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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