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原文传递一种用于测定微藻-菌联合体系中微藻和细菌干重的方法

专利名称：	一种用于测定微藻-菌联合体系中微藻和细菌干重的方法
摘要：	本发明属于微生物技术领域，公开了一种用于测定微藻‑菌联合体系中微藻和细菌干重的方法，第一步，微藻叶绿素浓度与微藻干重的标准曲线制定，B：第二步，制备待测混合悬液，第三步，测定待测混合悬液的干重m总，第四步，测定混合悬液中叶绿素的浓度，第五步，通过第一步得到的微藻叶绿素浓度与微藻干重的标准曲线结合第四步得到的混合悬液中的叶绿素浓度，计算混合体系中微藻的干重malgae，再通过第三步得到的混合悬液的干重m总，计算得到混合体系中细菌的干重mbacteria。通过该方法测得的联合体系中的微藻干重和细菌干重具有方法便捷，结果准确等特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	辽宁;21
申请人：	大连理工大学
发明人：	穆罕默德·拉塞尔;曲美雪;刘锡超;李小猛;柳丽芬
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201810466316.8
公开号：	CN108680520A
代理机构：	大连理工大学专利中心 21200
代理人：	陈玲玉
分类号：	G01N21/31(2006.01)I;G01N5/04(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N5;G01N21/31;G01N5/04
申请人地址：	124221 辽宁省盘锦市辽东湾新区大工路2号
主权项：	1.一种用于测定微藻‑菌联合体系中微藻和细菌干重的方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步，微藻叶绿素浓度与微藻干重的标准曲线制定：1.1 制备藻悬液：微藻在培养基培养至对数生长期后期，收获藻液；离心后，弃去上清液，使用去离子水重悬并再次离心清洗以去除原培养基的影响，加入去离子水定容至原体积，重悬成为与原始微藻浓度相同的藻悬液；1.2 测定藻悬液的干重：取适当体积的器皿放于干燥箱，烘干直至多次称量为恒重，记录其质量为M1，取一定体积V的待测藻悬液于烘干的器皿中，并放于水浴锅中蒸干，蒸干至多次称量为恒重，记为M2，则藻悬液的干重malgae＝(M2‑M1)/V*；测定三组以上包括不同稀释和浓缩倍数的藻悬液干重；1.3 测定微藻叶绿素浓度：将上述不同稀释和浓缩倍数的藻悬液进行萃取、离心，取上清液，通过测定指定波长的吸光值，计算相应藻悬液的叶绿素浓度；1.4 制得微藻叶绿素浓度与微藻干重的标准曲线：根据步骤1.3测定的微藻叶绿素浓度和步骤1.2测定的藻悬液的干重，制作离散曲线，得到线性回归方程，并检测线性回归方程的相关系数R2，若R2>0.99，则可作为标准曲线使用；第二步，制备待测混合悬液：取微藻‑细菌混合液离心得到微生物体，弃去上清液，使用去离子水重悬并再次离心清洗以去除原培养基的影响，最后加入去离子水定容至原体积，重悬成原微生物浓度的混合悬液；第三步，测定待测混合悬液的干重m总：取适当体积的器皿放于干燥箱，烘干直至多次称量为恒重，记录其质量为M1，取一定体积V的待测混合悬液于烘干的器皿中，并放于水浴锅中蒸干，蒸干至多次称量为恒重，记为M2，则混合体系的干重m总＝(M2‑M1)/V；第四步，测定混合悬液中叶绿素的浓度：使用水系抽滤膜抽滤待测混合悬液，将所得到的附着微藻的滤膜剪碎放入离心管中，加入二甲基亚砜，并在黑暗条件下在水浴锅中萃取两小时，待凉后加入丙酮溶液定容，将所得萃取液离心得到上清液，通过测定指定波长的吸光值，计算相应混合悬液中的叶绿素浓度；第五步，通过第一步得到的微藻叶绿素浓度与微藻干重的标准曲线结合第四步得到的混合悬液中的叶绿素浓度，计算混合体系中微藻的干重malgae，再通过第三步得到的混合悬液的干重m总，计算得到混合体系中细菌的干重mbacteria＝m总‑malgae。
所属类别：	发明专利