原文传递
对E.coli O157:H7免酶及免荧光标记的检测方法
| 专利名称： | 对E.coli O157:H7免酶及免荧光标记的检测方法 |
| 摘要： | 本发明提供了一种对E.coli O157:H7进行免酶及免荧光标记的检测方法，其包括如下步骤：将IS与适配子杂化，所述IS的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述适配子的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；将所得物置于缓冲液中，加入E.coli O157:H7，于37℃下反应30min；加入GHP1和GHP2，于37℃孵育100min；所述GHP1的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，所述GHP2的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；加入NMM，于37℃下孵育30min；对所得物进行荧光强度检测。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 四川;51 |
| 申请人： | 四川农业大学;中华人民共和国四川出入境检验检疫局 |
| 发明人： | 邹立扣;陈姝娟;付珍珍;余华;严玉宝;刘书亮;周康;敖晓琳;何利;杨勇 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201710522391.7 |
| 公开号： | CN107817228A |
| 代理机构： | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙) 51238 |
| 代理人： | 黎祖琴 |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/64 |
| 申请人地址： | 610000 四川省成都市温江区惠民路211号四川农业大学 |
| 主权项： | 一种对Escherichia coli O157:H7进行无酶及无标签化的检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)将IS与适配子杂化，所述IS的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述适配子的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；(2)将步骤(1)所得物置于缓冲液中，加入Escherichia coli O157:H7，于37℃下反应30min；(3)向步骤(2)所得物加入GHP1和GHP2，于37℃孵育100min；所述GHP1的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，所述GHP2的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；(4)向步骤(3)所得物加入NMM，于37℃下孵育30min；所述NMM为N‑甲基中卟啉(N‑methyl mesoporphyrin IX)；(5)对步骤(4)所得物进行荧光强度检测；优选的，步骤(1)所述杂化的条件为：于80～90℃，处理40‑55min。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
检索历史
应用推荐
