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基于与葡萄糖脱氢酶相偶联的羰基还原酶高通量筛选方法
| 专利名称： | 基于与葡萄糖脱氢酶相偶联的羰基还原酶高通量筛选方法 |
| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，公开了一种基于与葡萄糖脱氢酶相偶联的羰基还原酶高通量筛选方法，步骤一，采用偶联葡萄糖脱氢酶的方法构建适用于所有能直接或间接消耗NAD(P)H生成NAD(P)+的氧化还原酶的高通量筛选体系；步骤二，葡萄糖酸在酸性条件下发生内酯化，生成葡萄糖酸内酯；步骤三，葡萄糖酸内酯与羟胺碱反应，生成异羟肟酸；步骤四，异羟肟酸与三氯化铁反应可生成有色络合物，该络合物具有特征吸收峰，可通过分光光度比色法进行定量。本发明具有精度高、广谱性、检测浓度范围宽、成本低等特点。本发明操作简单，对实验人员的操作技能要求不高，无需大量的预实验。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 四川;51 |
| 申请人： | 四川理工学院 |
| 发明人： | 任志强;吴中柳;刘艳;裴小琼;李媛媛;车露萍 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810532104.5 |
| 公开号： | CN108802386A |
| 代理机构： | 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 |
| 代理人： | 赵红霞 |
| 分类号： | G01N33/573(2006.01)I;G01N21/78(2006.01)I;G01N21/31(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N21;G01N33/573;G01N21/78;G01N21/31 |
| 申请人地址： | 643000 四川省自贡市汇兴路学苑街180号 |
| 主权项： | 1.一种基于与葡萄糖脱氢酶相偶联的羰基还原酶高通量筛选方法，其特征在于，所述的基于与葡萄糖脱氢酶相偶联的羰基还原酶高通量筛选方法，包括以下步骤：步骤一，采用偶联葡萄糖脱氢酶的方法构建适用于所有能直接或间接消耗NAD(P)H生成NAD(P)+的氧化还原酶的高通量筛选体系；步骤二，葡萄糖酸在酸性条件下发生内酯化，生成葡萄糖酸内酯；步骤三，葡萄糖酸内酯与羟胺碱反应，生成异羟肟酸；步骤四，异羟肟酸与三氯化铁反应可生成有色络合物，该络合物具有特征吸收峰，可通过分光光度比色法进行定量。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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