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一种检测黑猩猩腺病毒AdC68的双抗体夹心酶联免疫法
| 专利名称： | 一种检测黑猩猩腺病毒AdC68的双抗体夹心酶联免疫法 |
| 摘要： | 一种检测黑猩猩腺病毒AdC68的双抗体夹心酶联免疫法，属于免疫分析技术领域。本发明以纯化兔抗AdC68抗体为包被抗体，纯化重组ADC68GFP为标准品，HRP酶标记的山羊抗腺病毒HEXON抗体为酶标抗体，含2%羊血清的PBST为样品稀释液，以双抗体夹心法检测黑猩猩腺病毒AdC68抗原、病毒蛋白、滴度、病毒颗粒等。该方法具有很高的特异性、灵敏度和精密度，与常用的紫外法测病毒颗粒和蚀斑法测病毒滴度相比，其适用性更广，适合在重组黑猩猩腺病毒纯化工艺过程中的在线检测。通过该方法能够在AdC68制备过程中快速估算病毒量，以指导上游病毒培养和下游纯化工艺。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 天津;12 |
| 申请人： | 天津津斯特生物技术有限责任公司 |
| 发明人： | 王宁;吴冠军;石慧颖 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810364446.0 |
| 公开号： | CN108828210A |
| 分类号： | G01N33/535(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/535;G01N33/569 |
| 申请人地址： | 300300 天津市东丽区空港经济区天保工业园4号厂房3层 |
| 主权项： | 1.一种检测黑猩猩腺病毒AdC68的双抗体夹心酶联免疫法，其主要步骤特征为：（1）包被抗体：纯化抗体用包被缓冲液（碳酸钠溶液）稀释，最佳包被浓度为1：50，每孔100ul，4℃过夜；（2）封闭：洗涤后，用PBST（含0.1%吐温20的PBS）配制2% BSA，每孔200ul，37℃封闭2hr；（3）捕获抗原：标准参考品和待测定样品用含2%羊血清PBST稀释，加样量为100ul，37℃孵育1hr；（3）加入酶标抗体：洗涤后，加HRP标记的羊抗腺病毒HEXON（购自Invitrogen），使用浓度为1：500，每孔100ul，37℃孵育1hr；（4）显色：洗涤后，用含0.01%TMB的显色液100ul，室温避光显色30min；（5）读数:加每孔50ul 2M H2SO4溶液终止，450/630nm 波长测定吸收值。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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