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原文传递一种菌渣中泰乐菌素残留效价的检测方法

专利名称：	一种菌渣中泰乐菌素残留效价的检测方法
摘要：	一种菌渣中泰乐菌素残留效价的检测方法，它涉及一种菌渣中泰乐菌素残留效价的检测方法，该方法包括对照品溶液的制备、供试品溶液的制备，之后采用高效液相色谱‑质谱联用法以梯度洗脱的方式将上述标准品溶液和供试品溶液注入液相色谱‑质谱联用仪中，根据外标法计算泰乐菌素效价。本发明通过对色谱条件的优选及供试品、标准品制备方法的试验，建立了菌渣中泰乐菌素的高效液相色谱‑质谱联用检测分析方法；通过对色谱以及质谱系统的优化，建立了菌渣中泰乐菌素的检测方法，通过方法学验证试验研究表明：所建立的方法准确度高、专属性强、重现性良好，能有效检测菌渣中泰乐菌素效价。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	宁夏;64
申请人：	宁夏希望田野生物农业科技有限公司
发明人：	王义;张鹏;金昌福;李宁飞
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201711479821.8
公开号：	CN108205031A
代理机构：	哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109
代理人：	贾泽纯
分类号：	G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06
申请人地址：	750200 宁夏回族自治区银川市贺兰县暖泉工业园区
主权项：	1.一种菌渣中泰乐菌素残留效价的检测方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：一、供试品样品制备：1)称取含有泰乐菌素菌渣，加入提取剂，涡旋振荡1～5min后，于超声中辅助提取20～30min，以3000～4000rpm离心5～10min，取上清液，并收集沉淀备用；2)将上步收集的沉淀，加入提取剂，涡旋振荡1min后，于超声中辅助提取30min，以3000～4000rpm离心10min，取上清液；3)合并步骤1)和步骤2)的上清液，将上清液于40℃水浴旋转蒸发至原体积的1/4～1/5，得无机相，向无机相中加入甲醇溶液以及pH为5.5、浓度为0.15mol/L的乙酸钠缓冲溶液；充分震荡涡旋，待残渣全部溶解后，转移到离心管中，得待净化样品；4)分别移取甲醇和超纯水对HLB固相萃取柱进行活化，加入上述处理所得待净化样品，以1mL/min速度过柱；待样液全部流出后，用水和淋洗液依次进行淋洗，抽干所有的液体，分析物用甲醇洗脱并收集，摇匀，过0.45μm滤膜后，得供试品样品，供液相色谱‑质谱检测；二、标准曲线绘制：用甲醇将泰乐菌素标准贮备液稀释成质量浓度为1.00mg/L、5.00mg/L、10.00mg/L、20.00mg/L、50.00mg/L、100.00mg/L、200.00mg/L和500.00mg/L的标准工作溶液，采用高效液相色谱‑质谱联用法对上述标准工作溶液进行检测，以测得峰面积作为纵坐标，以标准溶液浓度作为横坐标，绘制标准曲线，并求回归方程和相关系数；三、测定：吸取上述标准工作溶液和供试品样品注入液相色谱‑质谱联用仪中，采用在线固相萃取‑超高压液相色谱‑三重四极杆液相质谱仪，对土壤中残留泰乐菌素进行检测，并根据外标法计算泰乐菌素残留量；即完成所述的菌渣中泰乐菌素残留效价的检测；色谱条件：色谱柱：Agilent TC‑C18柱，色谱柱内径为4.6mm，柱长250mm，填料颗粒直径为5μm，流动相：甲醇‑0.1％甲酸溶液体系梯度洗脱，检测波长：290nm，进样量：20μL，流速：1mL/min，柱温：30℃；质谱条件：ESI电喷雾离子源；正离子扫描模式；采集方式：MRM；子离子质荷比：173.84离子源内毛细管电压：3.5kV；锥孔电压：50V；去溶剂气温度：350℃；离子源温度：150℃；脱溶剂气流量：900L/Hr；锥孔气流量：60L/hr。
所属类别：	发明专利