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原文传递一种生物样本中mPEG-PLA的定量测定方法

专利名称：	一种生物样本中mPEG-PLA的定量测定方法
摘要：	一种生物样本中mPEG‑PLA的定量测定方法，属于药物分析研究技术领域。该测定方法采用高效液相色谱‑质谱进行测定。首先制备标准曲线，然后将待测样本进行测定后通过标准曲线计算待测样本浓度。本发明中质谱条件基于三重串联质谱技术和源内裂解技术，设定为：mPEG‑PLA通过第一个质量分析器Q1，在特定解簇电压下发生源内裂解，产生并选择特定质荷比母离子，特定质荷比母离子的带电粒子通过第二个质量分析器Q2；在第二个通过质量分析器Q2中设置碰撞能量，将带电粒子打成碎片离子；在第三个质量分析器中选取稳定的特征碎片离子，来定量mPEG‑PLA。本发明针对生物样本中mPEG‑PLA分子量的不唯一性，建立一种操作简单，结果准确可靠的，重现性强的mPEG‑PLA定量分析方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	辽宁;21
申请人：	大连理工大学
发明人：	史美云;姜惠;尹磊;徐梦谣
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-03T00:00:00+0800
发布日期：	2019-04-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201811462486.5
公开号：	CN109668977A
代理机构：	大连理工大学专利中心
代理人：	李晓亮;潘迅
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	124221 辽宁省盘锦市辽东湾新区大工路2号
主权项：	1.一种生物样本中mPEG-PLA的定量测定方法，其特征在于，该测定方法采用液相色谱-离子阱质谱，并选取特定质荷比母离子m/z为433.0，子离子m/z为217.0的特异性离子对mPEG-PLA进行定量分析测定，该测定方法包括以下步骤：步骤A，建立mPEG-PLA测定标准曲线；步骤B，采用液相色谱-离子阱质谱测定待测样品，并通过步骤A所得标准曲线计算出待测样本中mPEG-PLA的浓度；所述的步骤B与步骤A的色谱条件和质谱条件相同，其中质谱条件为在串联质谱技术上结合源内裂解技术，质谱部分设定为：mPEG-PLA通过第一个质量分析器Q1，在特定解簇电压下发生源内裂解，产生并选择特定质荷比母离子，特定质荷比母离子通过第二个质量分析器Q2；在第二个通过质量分析器Q2中设置碰撞能量，将带电离子打成碎片离子；在第三个质量分析器中选取稳定的特征碎片作为子离子，进入质量分析器检测，对mPEG-PLA进行分析定量。 2.根据权利要求1所述的一种生物样本中mPEG-PLA的定量测定方法，其特征在于：质谱条件为：正离子方式检测：离子喷雾电压：5500V；温度：500℃；气帘气体(CUR)氮气压力为35psi；气体1氮气压力(GS1)为50psi、气体2氮气压力(GS1)50psi；mPEG-PLA扫描方式为MRM，解簇电压为50V，质量分析器Q2中碰撞能量为26eV；色谱条件为：流动相为甲酸体积百分数占0.1％的水溶液和异丙醇与乙腈体积比为2:1的有机相溶液，梯度洗脱，柱温40℃，流速0.3mL/min。 3.根据权利要求1或2所述的一种生物样本中mPEG-PLA的定量测定方法，其特征在于：所述的步骤A包括以下步骤： (1)制备内标溶液和梯度稀释的不同浓度的mPEG-PLA标准溶液； (2)于抗吸附管中加入内标溶液、空白基质、mPEG-PLA标准溶液和乙腈溶液后涡流混匀，离心后取上清液进样到高效液相色谱-质谱中进行分析； (3)取不同浓度的mPEG-PLA标准溶液重复步骤(2)，记录色谱图，色谱图中mPEG-PLA浓度为横坐标，mPEG-PLA色谱峰面基与内标峰面积的比值为纵坐标，采用加权W＝1/X2最小二乘法进行回归运算，求得的直线回归方程即为标准曲线；所述的步骤B包括以下步骤： (1)于抗吸附管中加入内标溶液、待测样本、mPEG-PLA待测样本和乙腈溶液后涡流混匀，离心后取上清液进样到高效液相色谱-质谱中进行分析，得到待测样本mPEG-PLA的峰面积与内标峰面积； (2)将步骤(1)中获取的待测样本mPEG-PLA的峰面积与内标峰面积的比值带入步骤A得到的标准曲线中，求得mPEG-PLA浓度。 4.根据权利要求3所述的一种生物样本中mPEG-PLA的定量测定方法，其特征在于：所述的测定方法中内标为奥卡西平，定量离子对为253.3/208.2。
所属类别：	发明专利