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原文传递一种评价中成药对大鼠细胞色素P450不同亚型酶活性影响的方法

专利名称：	一种评价中成药对大鼠细胞色素P450不同亚型酶活性影响的方法
摘要：	本发明属于中成药药物评价技术领域，公开了一种评价中成药对大鼠细胞色素P450不同亚型酶活性影响的方法，包括样品制备、HPLC方法的建立以及检测待测样品中CYP450酶的活性，CYP450酶包括CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4。本发明的优点在于，该方法采用咖啡因、美托洛尔、奥美拉唑和咪达唑仑作为探针测定参松养心胶囊、芪苈强心胶囊和通脉养心胶囊的对CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4酶的活性的影响，整个方法简单、灵敏度高且特异性好，并且为预测临床上这三种中成药与CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4底物药合用时可能产生的相互作用提供临床药理学参考依据，指导中西药物的合理应用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	云南;53
申请人：	大理大学
发明人：	赖泳;李春艳;张海珠;郝芳芳;吴俊珠
专利状态：	有效
申请号：	CN201811386367.6
公开号：	CN109374772A
代理机构：	成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224
代理人：	李想
分类号：	G01N30/02(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	671000 云南省大理白族自治州大理市大理古城弘圣路2号
主权项：	1.一种评价中成药对大鼠细胞色素P450不同亚型酶活性影响的方法，其特征在于，包括如下步骤：A、样品制备：样品为大鼠肝微粒体或大鼠血浆；B、HPLC方法的建立：B1、配置四种探针药物储备液和内标工作液，所述四种探针药物储备液分别为咖啡因、美托洛尔、奥美拉唑和咪达唑仑储备液；B2、专属性验证：B21、将四种探针药物储备液混合，得到探针混合液；B22、分别取探针混合液、内标工作液和样品，将探针混合液和内标工作液混合得到混合液一，将样品、探针混合液和内标工作液混合得到混合液二，将处理后的样品和内标工作液混合得到混合液三；B23、将混合液一、混合液二、混合液三和样品分别处理，上样，测定HPLC结果；B3、制备标准曲线：对四种探针药物储备液分别进行梯度稀释，得到四种探针的不同浓度的探针药物储备液，向样品中加入所述不同浓度的探针药物储备液，处理，上样，测定HPLC结果；B4、精密度验证；取样品，加入不同浓度的探针混合液，处理，上样，测定HPLC结果；B5、回收率测定：取样品，加入不同浓度的探针混合液，处理，过滤，上样，测定HPLC结果；B6、稳定性测定：取样品，加热，冷却后加入不同浓度的探针混合液，处理，上样，测定HPLC结果；C、检测待测样品中CYP450酶的活性：CYP450酶包括CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4；C1、液体配制：配制阳性抑制剂储备液和中成药溶液，所述中成药溶液中的中成药为参松养心胶囊、芪苈强心胶囊和通脉养心胶囊中任意一种；C2、酶活测定样品的制备：所述酶活测定样品为处理后的大鼠肝微粒体或大鼠血浆，所述酶活测定样品为处理后大鼠肝微粒体时，用探针混合液和中成药共同处理大鼠肝微粒体，得到处理后大鼠肝微粒体；所述酶活测定样品为处理后大鼠血浆：用探针混合液和中成药共同处理大鼠，取血浆，得到处理后大鼠血浆；C3、测定：取酶活测定样品，沉淀蛋白，取上清，过滤，上样，测定探针药物的剩余量。
所属类别：	发明专利